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胰岛素样生长因子Ⅰ对实验性外斜视猫内直肌肌分化因子5、转化生长因子β1表达的影响
目的 探讨外源性胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)对外斜视猫模型内直肌肌分化因子5 (Myf5)、转化生长因子β1(TGF-β1)表达变化的影响.方法 实验研究.选择处于视觉发育敏感期内幼猫(4~6周)27只,采用随机数字表法分为实验组、无菌水对照组和空白对照组,各组再根据药物干预时间分为4周亚组、8周亚组、12周亚组,每亚组3只.通过缩短外直肌并前徙制作右眼外斜视幼猫模型后,实验组将外源性IGF-Ⅰ0.05 ml(0.1 g/L)注射到右眼内直肌建立外斜视治疗模型;无菌水对照组注射等量无菌水;空白对照组未进行注射.各组分别于药物干预后4、8、12周取完整右眼内直肌,采用免疫组织化学染色法检测内直肌Myf5和TGF-β1平均吸光度(A)值.采用Kruskal-Wallis、Bonferroni检验方法分析Myf5和TGF-β1表达的变化,采用简单线性回归等方法分析Myf5和TGF-β1表达与药物干预时间的相关性.结果 (1)药物干预4周时,实验组内直肌Myf5的A值(33.34±17.16)与无菌水对照组(21.30±7.44)和空白对照组(18.95±6.59)比较,差异无统计学意义(χ2=4.646,P>0.05);药物干预8、12周时,实验组内直肌Myf5的A值分别为39.24±15.25和47.70±19.39,高于同时间点的无菌水对照组(19.43±4.75、4.82±2.66)和空白对照组(18.00±7.29、5.86±2.61),差异均有统计学意义(χ2=21.864、31.814,均P＜0.01).实验组内直肌Myf5的A值随着IGF-Ⅰ干预时间的延长呈增加趋势(R2=0.99,P＜0.05);无菌水对照组及空白对照组内直肌Myf5的A值随时间延长呈降低趋势(R2=0.81、0.80,均P＜0.05).(2)药物干预4、8、12周时,实验组内直肌TGF-β1的A值分别为0.80±0.12、0.53±0.09和0.42±0.08,均低于同时间点的无菌水对照组(1.91±0.23、2.30±1.03、1.82±0.72)及空白对照组(2.01± 0.31、2.62±1.11、1.83±0.67),差异均有统计学意义(χ2=30.801、40.278、35.177,均P＜0.01).实验组内直肌TGF-β1的A值随着IGF-Ⅰ干预时间延长呈降低趋势(R2=0.83,P＜0.05);无菌水对照组及空白对照组内直肌TGF-β1A值与时间无相关性趋势(R2=0.04、0.06).结论 外源性IGF-Ⅰ对外斜视猫模型内直肌中Myf5的表达具有增强作用,对TGF-β1的表达具有抑制作用.重复注射外源性IGF-Ⅰ可使Myf5持续增强表达,TGF-β1持续减弱表达.
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实验性外斜视猫模型内直肌的NGF和Myf5表达变化
目的 观察共同性外斜视猫模型内直肌中神经生长因子(NGF)和生肌调节因子5(Myf5)表达变化及其与斜视时间的相关性.方法 实验研究.选择处于视觉发育敏感期内幼猫(4～6周)18只,随机分为实验组和对照组;根据斜视时间实验组分为斜视1个月组、2个月组、3个月组,每组各3只;对照组随机分为对照1、2、3组(分别与斜视1个月、2个月、3个月组对应),每组各3只.实验组通过右眼外直肌缩短联合前徙制作外斜视模型,分别于术后1个月、2个月、3个月取实验组及相应对照组的右眼内直肌,固定、脱水、石蜡包埋、切片,免疫组织化学染色法检测内直肌NGF和Myf5平均光密度值,所得数据用小样本成组资料的t检验或t'检验、重复测量的方差分析及Pearson相关分析法进行统计.结果 ①实验组内直肌中NGF的平均光密度值低,斜视2个月组、3个月组与对应对照组内直肌中NGF的表达量进行比较,差异具有统计学意义(t=7.678、15.532,P＜0.01).②Myf5在实验组内直肌中的平均光密度值低,斜视2个月组、3个月组与其对照组内直肌Myf5的表达量差异具有统计学意义(t=5.819、7.029,P＜0.01).③外斜视猫模型内直肌中NGF、Myf5平均光密度值与斜视时间呈负相关(r=-0.984、-0.971,P＜0.05).结论 ①外科手术的方法可成功制作外斜视猫模型.②实验性外斜视猫内直肌中NGF和Myf5表达量的降低可能参与了斜视的发生.③实验性外斜视猫内直肌中NGF和Myf5的表达量随斜视病程的延长而降低,该变化可能与斜视病情的进展相关.
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IGF-Ⅰ对外斜视猫模型内直肌Myf5和MyoD表达影响
目的 观察外源性胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)对外斜视猫模型内直肌生肌因子5(Myf5)、成肌分化因子(MyoD)表达的影响,探讨外源性IGF-Ⅰ治疗斜视的可行性.方法 选择视觉发育期内的幼猫,行外科手术制备外斜视模型.实验组术后即刻及术后每2周右眼内直肌注射50 μL(5 μg) IGF-Ⅰ,标准对照组注射50 μL生理盐水,空白对照组不做注射治疗.分别于治疗4、8、12周时处死幼猫取眼外肌组织,提取RNA进行荧光定量PCR,观察各组幼猫内直肌MyoD和Myf5表达差异及其与治疗时间的关系.结果 治疗4周时,3组My f5、MyoD mRNA表达量差异无统计学意义(P＞0.05);治疗8、12周时,实验组My f5、MyoD mRNA表达量均较空白对照组、标准对照组升高,差异具有统计学意义(F=14.388～342.990,P＜0.01).实验组My f5、MyoD mRNA的表达量随治疗时间延长逐渐升高,与治疗时间呈正相关关系(r=0.949、0.949,P＜0.01);标准对照组、空白对照组My f5和MyoD mRNA表达量与治疗时间无相关性(P＞0.05).结论 IGF-Ⅰ局部注射能够促进眼外肌中My f5和MyoD mRNA的表达,随着作用时间的延长其作用更加明显.
