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神经元周围网和Nogo受体在大鼠视皮层的发育及氟西汀对其的影响
目的 探讨视皮层神经元周围网(PNN)及Nogo受体在大鼠视觉发育过程中的变化及氟西汀对成年大鼠视皮层PNN及Nogo受体的影响.方法 实验研究.(1)按出生后周龄(1、3、5、7、9周)将Wistar大鼠分为5组,每组8只,观察大鼠脑正常发育过程中视皮层PNN及Nogo受体的变化;(2)根据氟西汀给药周数不同将成年(出生后10周)大鼠采用完全随机化法分为对照组及氟西汀2、4、6、8周组,每组8只,观察不同给药时间对大鼠脑视皮层PNN及Nogo受体的影响;(3)设立双眼形觉剥夺(BFD)组作为阳性对照,按干预方式不同将成年(出生后10周)大鼠采用完全随机化法分为阴性对照组、氟西汀组、BFD组和BFD±氟西汀组,每组8只,观察不同干预方法对大鼠脑视皮层PNN和Nogo受体的影响效果.采用免疫荧光法观察各组大鼠脑视皮层Nogo受体和PNN的表达变化,采用免疫印迹法检测各组大鼠脑视皮层Nogo受体蛋白的表达.组间比较根据方差齐性与否,选择t检验、方差分析或秩和检验;多重比较采用Bonferroni法,并对检验水准进行调整;组内指标变化趋势采用简单线性回归分析.结果 (1)随大鼠发育周龄增加,PNN (b=0.97,P=0.005)及Nogo受体阳性细胞密度(b=0.96,P=0.010)在视皮层呈逐渐增加;Nogo受体蛋白表达随出生后周龄逐渐增加(b=0.96,P=0.010),7周龄组(131.83±3.78)接近成年(9周龄组,135.11±3.92)水平(Z=1.93,P=0.062).(2)免疫荧光显示氟西汀可显著降低成年大鼠视皮层的PNN,氟西汀喂养健康成年大鼠4周视皮层PNN阳性细胞密度(86.22±7.68)个/mm2与3周龄大鼠(84.21±6.68)个/mm2相当(t=2.08,P=0.073).随氟西汀喂养周数增加,成年大鼠视皮层PNN(b=-0.88,P=0.040)及Nogo受体(b=-0.90,P=0.007)阳性细胞密度逐渐下降.(3)免疫荧光显示氟西汀组、BFD组及BFD+氟西汀组均较阴性对照组出现PNN(t=10.09、7.64、13.01;P=0.007、0.011、0.001)及Nogo受体阳性细胞密度(t=13.42、11.47、18.13;P=0.012、0.013、0.001)的下降;但氟西汀组与BFD组间Nogo受体比较差异无统计学意义(t=2.41,P=0.153).免疫印迹显示氟西汀组、BFD组及BFD+氟西汀组相对阴性对照组Nogo受体蛋白的表达量分别为81.83±2.68、81.39±2.09及72.90± 1.01,多组间差异有统计学意义(H=5.69,P=0.041);且氟西汀联合BFD降低Nogo受体蛋白表达上与各自单独作用不同,表现为二者联合效果优于各自单独效果(氟西汀组与BFD+氟西汀组比较,Z=4.22,P=0.005;BFD组与BFD+氟西汀组比较,Z=3.09,P=0.010).结论 大鼠脑视皮层的PNN和Nogo受体的发育呈视觉经验依赖性,随大鼠视觉发育,其视皮层PNN和Nogo受体逐渐增加;氟西汀可显著降低成年大鼠脑视皮层内的PNN和Nogo受体,且其效果与BFD相当.
