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碳点在成骨细胞系内跨膜转运机制的研究
目的 探讨碳点(carbon dots, CDs)在MC3T3-E1内的跨膜转运机制与其特点.方法 抗坏血酸(ascorbic acid,AA)和聚乙烯亚胺(polyethylenimine,PEI)采用一步微波法制备出荧光CDs. 使用MTT法检测CDs对MC3T3-E1增殖的影响,流式细胞术观察MC3T3-E1对CDs的细胞摄取过程,同时观察时间、浓度、温度、跨膜抑制剂及能量抑制剂对CDs跨膜转运的影响.应用原子力显微镜观测在CDs跨膜转运的过程中细胞膜表面形态结构变化.结果 CDs在加入后15min被 MC3T3-E1摄取,分布均匀,受时间、浓度、温度和各抑制剂影响,细胞摄取率随时间延长和剂量递增而变化.与对照组相比,低温4℃组能量抑制剂-叠氮化钠(sodium azide,SA)组细胞摄取率显著降低(P<0.01),网格蛋白抑制剂-氯丙嗪(chlorpromazine,CPZ)组细胞摄取率明显降低(P<0.05),无血清培养基(serum-free medium,SFM)组细胞摄取率显著升高(P<0.01).在细胞摄取15min时细胞膜表面出现大小均匀的凹陷.结论 CDs在MC3T3-E1内的细胞摄取是一个时间、剂量依赖性且耗能的动态过程.血清抑制细胞摄取.CDs主要通过网格蛋白途径进入细胞.
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生物力刺激和促丝裂原激活蛋白激酶对骨改建的影响
生物力信号转导是骨生物学研究的热点之一.通过研究流体剪切力、细胞外基质形变等生物力刺激下成骨细胞系的应答发现,生物力信号转导涉及促丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)信号转导通路在内的多种信号系统.生物力刺激作用于整联蛋白、钙离子通道和脂筏等感受器,激活MAPK信号转导通路并通过级联反应调节下游分子的活性,如核心结合因子-α1和激活蛋白1等转录因子,进而调控成骨细胞的功能.同时生物力刺激诱导的MAPK信号转导通路与雌激素受体、甲状旁腺素受体和1,25-二羟胆骨化醇受体等信号转导通路存在交联作用,是生物力信号转导的重要途径.
关键词： 成骨细胞系 生物力信号转导 促丝裂原激活蛋白激酶
