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固相斑点杂交法文献资料
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重组人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体蛋白的DDNA残留量检测
目的:重组人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(rhTrail)是一种治疗肿瘤的蛋白药物.其质量控制中,参照2005年<中华人民共和国药典>第三部规定,单支剂量的外源性DNA含量不应超过10ng.通过纯化,我们得到重组大肠杆菌表达的rhTrail蛋白,对其进行了DNA残留检测.方法:参照固相斑点杂交和地高辛核酸探针法,利用DNA地高辛标记和检测试剂盒,制备了地高辛标记宿主DNA探针,对三个rhTrail样品进行DNA残留检测.结果:杂交膜上,宿主DNA带显色,颜色按DNA上样量高低由深至浅,呈梯度差异,三个rhTrail蛋白样品的上样带颜色均较参比的宿主DNA100pg上样带颜色浅.结论:通过换算,三个样品单支剂量的DNA残留均低于10ng,符合DNAA残留要求.
关键词： 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 DNA残留 地高辛 固相斑点杂交法
