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RECK基因和基质金属蛋白酶-2在成釉细胞瘤的表达及相关性研究
目的 探讨RECK和基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的表达与成釉细胞瘤(AB)临床生物学行为的关系及相关性.方法 应用免疫组化EliVisionTM plus法检测69例AB(原发45例,复发24例)、6例成釉细胞癌和16例牙源性角化囊性瘤(KCOT)中RECK、MMP-2蛋白的表达,同时采用RT-PCR方法 检测22例AB(原发12例,复发10例)、2例成釉细胞癌和16例KCOT中RECK、MMP-2 mRNA的表达水平.所有数据采用SPSS 13.0统计软件包进行统计学分析.结果 RECK蛋白的阳性表达率在KCOT、AB和成釉细胞癌中依次明显降低(P ＜ 0.05),且复发AB显著低于原发AB(P ＜ 0.01);AB和成釉细胞癌的MMP-2蛋白阳性表达率均显著高于KCOT(P ＜ 0.05);RECK 蛋白与MMP-2蛋白在AB中的表达呈负相关(r＝-0.431,P ＜ 0.001).RECK mRNA在AB、KCOT中均见表达,但在AB的表达较KCOT显著降低(P ＜ 0.001),成釉细胞癌中则无表达;MMP-2 mRNA在KCOT、AB和成釉细胞癌中均见表达,但在AB的表达水平较KCOT显著增高(P ＜ 0.001),在成釉细胞癌中均呈高水平表达;复发AB的RECK mRNA表达水平较原发AB显著降低(P ＜ 0.05),但复发与原发AB的MMP-2 mRNA 表达之间差异无统计学意义;RECK mRNA与MMP-2 mRNA在AB中的表达水平无相关性(P ＞ 0.05).结论 RECK表达降低或缺失及MMP-2表达增高与AB的临床生物学行为密切相关.RECK可能通过转录后水平调控MMP-2参与AB的侵润、复发和恶性转化过程.
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小鼠肾脏缺血-再灌注损伤miRNAs差异表达谱研究
目的 筛选小鼠肾脏缺血-再灌注损伤(IRI)差异性表达的微小核糖核酸(miRNAs),为进一步深入阐明肾脏IRI发生、发展的分子机制奠定基础.方法 应用微型动脉夹夹闭小鼠双侧肾动脉制备急性肾缺血损伤模型,将15只小鼠分为IRI组和假手术组(E组),IRI组再分为A组(缺血时间45 min,再灌注时间24 h)、B组(缺血时间25 min,再灌注时间24 h)、C组(缺血时间45 min,再灌注时间4h)、D组(缺血时间25 min,再灌注时间4 h),每组3只.采用肾脏组织形态学改变和肾功能评估结果来鉴定各组小鼠的IRI程度;采用miRNAs芯片聚类分析对小鼠IRI特定缺血时间(25、45 min)和再灌注时间(4、24 h)下肾脏差异性表达差异表达的miRNAs进行筛选鉴定;采用实时定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)对小鼠IRI后差异表达miRNAs芯片miR-695与miR-145进行验证.结果 肾脏组织形态学改变和肾功能评估结果显示成功建立IRI模型.与假手术组相比,肾脏IRI组共检出71种差异性表达显著的miRNAs,其中30种下调表达,41种上调表达.qRT-PCR法检测结果表明,以E组特定miRNAs的表达量标准化为1,miR-695及miR-145在肾脏IRI组的相对表达量分别为11.82和0.31(均为 P＜0.05),与芯片结果基本一致.结论 肾脏IRI后,miRNAs表达谱发生差异性改变,这些差异性表达的miRNAs将可作为肾脏IRI的分子标志物而具有潜在的临床及科研应用价值.
