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坐骨神经选择性损伤应激对大鼠颌下腺中annexin 5表达的影响
目的 研究坐骨神经选择性损伤引起的慢性疼痛应激态下SD大鼠颌下腺中annexin 5表达的变化.方法 72只SD大鼠随机均分为3组:手术组、假手术组和对照组(每组24只).手术组:用氯胺酮(40mg/kg)腹腔注射麻醉后,切开左后肢侧面皮肤和股二头肌,暴露大鼠坐骨神经干及其3个分支:胫神经、腓总神经和腓肠神经,结扎并切断胫神经和腓总神经,保留腓肠神经以建立坐骨神经分支选择性损伤(SNI)模型.假手术组:只暴露坐骨神经干及其分支而不损伤神经.对照组:不做任何处理.分别于手术后14、21、28d从各组中取8只大鼠,麻醉后处死,分离颌下腺组织置于液氮内保存备用.然后通过免疫组织化学和Western blotting检测坐骨神经选择性损伤后14、21、28d时各组大鼠颌下腺中annexin 5蛋白定位及表达的变化.结果 免疫组化结果显示,annexin 5主要定位在颌下腺润管、分泌管及排泄导管上皮细胞中.术后14d,annexin 5在颌下腺的定位明显减少,Western blotting结果显示术后14d时与对照组比较,手术组大鼠颌下腺中annexin 5表达水平显著降低(P<0.01),与假手术组比较,手术组annexin 5表达水平也显著下降(P<0.05).但术后21和48d手术组与对照组、假手术组比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 坐骨神经选择性损伤引起的慢性疼痛应激能下调SD大鼠颌下腺中annexin 5的表达,annexin 5可能参与了颌下腺对应激的反应.
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pcDNA3.1-Annexin A1真核表达载体对结直肠癌细胞迁移、侵袭的影响
目的 探讨Annexin A1对结直肠癌细胞迁移、侵袭能力的影响.方法 构建重组质粒pcDNA3.1-AnnexinA1,转染至结直肠癌细胞株SW480中,G418筛选稳定表达株,实时荧光定量PCR、蛋白质印迹检测转染前后Annexin A1mRNA及蛋白表达;以空载体转染组及未转染SW480细胞作为对照,通过划痕修复实验和Transwell细胞侵袭实验对转染前后细胞的迁移和侵袭能力进行比较观察和分析.结果 成功构建重组质粒pcDNA3.1-Annexin A1载体;实时荧光定量PCR和蛋白质印迹检测结果均显示,重组体pcDNA3.1-Annexin A1稳定转染细胞株中Annexin A1 mRNA及蛋白表达均明显高于空载体转染及未转染组细胞(P<0.01),而后两者间比较差异无统计学意义(P>0.05);重组体pcDNA3.1-Annexin A1转染组SW480细胞的迁移率(0.415±0.002)明显高于空载体转染组(0.267±0.003)及未转染组细胞(0.271±0.002),差异具有统计学意义(P<0.05),而后两者间差异无统计学意义(P>0.05);与空载体转染组(162.80±12.07)及未转染组(164.25±9.50)相比,重组体pcDNA3.1-Annexin A1转染组穿膜细胞数(221.75±12.07)增多,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 人Annexin A1基因表达上调能提高结直肠癌细胞迁移和侵袭能力.
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Annexin A4在结直肠癌中的表达及意义
目的 研究Annexin A4在结直肠癌组织中的表达及意义,以探讨结直肠癌的发生机制.方法 采用Western blot的方法对正常结直肠组织以及Dukes A、B、C、D期结直肠癌组织进行Annexin A4及其磷酸化检测.结果 在正常组织及结直肠癌组织中Annexin A4和其磷酸化均有表达,Annexin A4在Dukes A和B期表达高,Dukes C和D期略低于正常组织,磷酸化Annexin A4在Dukes A期表达高,Dukes B、C和D期与正常组织差异无统计学意义.结论 结直肠癌组织中Annexin A4的异常表达与结直肠癌的发生发展是相关的.
