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内皮型一氧化氮合酶基因转染联合西地那非对大鼠急性低氧性肺动脉高压的影响
目的 探讨内皮型一氧化氮合酶(eNOS)基因转染联合西地那非对大鼠急性低氧性肺动脉高压(PH)的影响.方法 雄性Wistar大鼠36只,采用随机数字表法均分为常氧(N)组、低氧(H)组、低氧LacZ(H-LacZ)组、低氧eNOS(H-eNOS)组、低氧西地那非(H-S)组和低氧eNOS-西地那非(H-eNOS-S)组.H-eNOS和H-eNOS-S组给予5 × 109 PFU/ml的AdCMVceNOS 600μl,H-LacZ组给予等量AdCMVLacZ,其他组给予等量生理盐水.3d后建立急性PH模型,H-S组和H-eNOS-S组在低氧前给予0.3%西地那非25mg/kg.其他组给予等量生理盐水.低氧处理结束后测定大鼠平均体循环血压(mSAP)和平均肺动脉压(mPAP).分别应用免疫组化染色和X-gal染色检测肺组织eNOS、LacZ基因的表达,硝酸还原酶法和放射免疫法检测一氧化氮(NO)和环磷酸鸟苷(cGMP)的含量.结果 H-eNOS和H-eNOS-S组肺组织均有eNOS表达,H-LacZ组有LacZ基凶表达.H-eNOS和H-S组mPAP明显低于H和H-LacZ组(P<0.01).高于H-eNOS-S组和N组(P<0.01),H-eNOS-S与N组无差异.各低氧组mSAP明显低于N组(P<0.05),且各低氧组问无显著差异(P>0.05).N组NO含量明显高于H、H-LacZ和H-S组,低于H-eNOS和H-eNOS-S组(P<0.05),且H、H-LacZ、H-S三组间以及H-eNOS、H-eNOS-S两组间无统计学差异(P>0.05).H和H-LacZ组cGMP含量明显低于N组(P<0.05),而H-eNOS和H-S组明显高于N组(P<0.05),但低于H-eNOS-S组(P<0.01).结论 eNOS基因转染联合西地那非可协同性增加肺组织cGMP含量,具有选择性肺血管舒张作用,从而阻止大鼠急性PH的发生.
