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基因组RNA文献资料
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西部马脑炎病毒基因组序列的RT-PCR检测
目的:建立敏感、特异的西部马脑炎(western equine encephalitis,WEE)病毒RT-PCR检测方法.方法:首先采用逆转录法将病毒基因组RNA逆转录为cDNA,然后以此cDNA为模板,进行PCR扩增.并对PCR扩增过程中的模板量、循环数、Mg2+浓度、退火温度和延伸时间等条件进行优化,以提高检测的特异性和敏感性. 结果:采用经优化的条件进行PCR扩增获得了约350bp的单一DNA片段,其大小与预期的相一致,且可自0.1TCID50的病毒液中检测出WEE病毒基因组序列.结论:所建立的RT-PCR方法可自病毒感染的小鼠脑组织和传代细胞中检测WEE病毒的基因组RNA.