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延迟氟桂嗪、尼莫地平处理支持大鼠坐骨神经元存活
目的:观察、比较氟桂嗪与尼莫地平对慢性退变中神经元的保护作用.方法:21只生后2 d新生大鼠,切断右侧坐骨神经作为实验侧,左侧为正常对照侧.术后第5天,氟桂嗪组皮下注射氟桂嗪(25 μg/g体重),尼莫地平组皮下注射尼莫地平(20 μg/g体重),对照组注射等量溶剂,连续14 d,然后取L4～6脊髓,在光镜下观察并计数脊髓前角神经元.结果:在神经元慢性退变过程中,氟桂嗪组与尼莫地平组可以分别平均支持78.3%和58.1%神经元存活, 统计学上以前者占优势,且两者与对照组相比(存活53.2%)差异显著.氟桂嗪组实验侧脊髓前角神经元核团改变较小,其胞体萎缩程度较轻.结论:氟桂嗪与尼莫地平对慢性退变过程中神经元均有保护作用,而氟桂嗪的保护作用更显著.
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切断后轴突再生方式和速度的初步研究
目的 建立离体中枢神经系统轴突机械切断模型,观察机械切断后轴突的再生方式和速度. 方法 离体培养新生小鼠皮质神经块,免疫荧光特异染色标记轴突和树突.机械切断轴突建立模型.通过追踪黏附在轴突残段表面细胞点的移动来观察轴突再生方式,并测量再生轴突的生长速度. 结果 (1)在机械切断小鼠皮质神经块轴突后,可见再生轴突从断端长出,分布在轴突残段上的细胞点随着轴突的再生而越过切痕散布到远端.(2)切断组再生轴突在第24,48小时的生长速度分别为(118±32)μm/d、(72±41 )μm/d,而对照组未切断轴突生长速度分别为(41±17)μm/d、(32±19)μm/d. 结论 切断后轴突再生方式是轴突残段生长延伸,而非轴突残端出芽生长,并且切断后再生轴突生长速度快于未切断轴突.
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体外神经块轴突机械切断再生模型的建立
目的 建立适用于机械损伤后轴突再生研究的模型.方法 微玻璃管接种神经块法或常规法分别接种神经块至培养皿,免疫荧光和RT-PCR检测胞体和树突在轴突区域的分布情况.显微镜下机械切断轴突后,免疫荧光和RT-PCR检测再生轴突的纯度.结果 相对于常规神经块接种法,在使用微玻璃管接种法的神经块外1/2轴突中,免疫荧光和RT-PCR检测结果显示细胞核和树突为阴性.在使用微玻璃管接种法的神经块切断后再生轴突中,免疫荧光和RT-PCR检查结果显示树突和细胞核未混入再生轴突.结论 微玻璃管接种神经块能获得足够纯净的轴突和再生轴突.机械切断模型的建立为创伤后轴突的分子研究奠定了基础.
