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IL-8基因真核表达载体的构建及其在OVCAR-3卵巢癌细胞中的表达
目的:构建白细胞介素8(interleukin 8,IL-8)基因真核表达载体,瞬时转染OVCAR-3卵巢癌细胞,为进一步探讨其与肿瘤发生发展关系奠定基础.方法:采用RT-PCR法自健康志愿者外周血单个核细胞扩增IL-8基因,构建pcDNA3.1(+)/IL-8重组质粒;脂质体介导将外源基因转入OVCAR-3卵巢癌细胞,半定量RT-PCR、Western印迹及ELISA法鉴定其mRNA及蛋白瞬时表达后,MTT法检测细胞转染前后生长增殖特性的改变,FCM检测细胞周期的变化.结果:重组质粒双酶切电泳结果显示,相应位置(300 bp,5 400 bp)可见2条清晰特异的DNA条带;DNA测序结果进一步显示,重组质粒中插入的基因片段全长 300 bp,编码序列与GenBank报道的基因序列相符,阅读框保持不变;RT-PCR、Western 印迹检测及ELISA检测结果显示,转染后OVCAR-3细胞IL-8 mRNA及蛋白表达水平均明显升高(P<0.05);MTT检测结果显示,IL-8转染细胞组转染3 d后的光密度值(D值)显著高于未转染细胞组(P<0.05);FCM分析结果显示,OVCAR-3细胞转染IL-8基因后进入S期的细胞比例显著增高,增殖指数也相应上升,与未转染及空质粒转染组细胞相比,差异显著(P<0.05).结论:IL-8基因真核表达载体成功构建并瞬时转染OVCAR-3卵巢癌细胞;IL-8可以自分泌方式促进卵巢癌OVCAR-3细胞生长增殖.
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复发星形细胞瘤瘤内囊液中VEGF、IL-8的测定及意义
目的:了解胶质瘤患者瘤内囊液及血清中血管内皮生长因子(VEGF)、白细胞介素-8(IL-8)的水平.方法: 收集44例复发星形细胞瘤患者瘤内囊液和血清为囊液组与异常血清组,以20例正常人血清为对照,应用酶联免疫吸附分析法(ELISA)分别测定囊液和血清中VEGF IL-8水平.结果: ①囊液组中VEGF水平为9111.12±5789.34pg/ml,与囊腔大小正相关性,高于异常血清中VEGF33.89±6.71pg/ml和正常血清中16.78±3.7pg/ml,组间比较有显著性差异(P均<0.01).②囊液组中IL-8水平为3823.71±1256.48pg/ml,与囊腔大小无相关性,高于异常血清中IL-8水平43.44±24.84pg/ml和正常血清中IL-8水平0.60±0.3pg/ml,组间比较有显著性差异(P均<0.01).结论: 复发星形细胞瘤瘤内囊液VEGF, IL-8高水平可能与肿瘤生长增殖有关.
关键词： 复发星形细胞瘤 囊液VEGF、IL-8 肿瘤生长增殖
