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  • BRCC3基因敲除小鼠的构建和表型初步分析

    作者:肖阳;任广明;詹轶群;于淼;李长燕;杨晓明;尹荣华

    目的 构建BRCC3(BRCA1/BRCA2-containing complex subunit 3)基因敲除小鼠,并对其表型进行初步研究.方法 利用Cas9/sgRNA基因编辑技术构建BRCC3基因敲除小鼠;提取鼠尾基因组DNA,在DNA水平对小鼠基因型进行鉴定;提取小鼠心、肝、脾、肺、肾的RNA和蛋白质,利用Real-time PCR和Western印迹(WB)技术检测BRCC3基因的表达.观测敲除小鼠体质量变化趋势及可能影响生长发育和代谢的指标;对小鼠的主要脏器进行苏木精-伊红(HE)染色;小鼠外周血血常规检测.结果 成功构建了BRCC3基因敲除小鼠.BRCC3敲除小鼠可正常生长繁殖,血脂和肝功能等代谢指标基本正常,各组织器官无明显病变,外周血血常规各指标均正常.BRCC3敲除小鼠体质量增加,血清胆固醇含量增高.结论 BRCC3可能参与小鼠体质量调节及胆固醇代谢.