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钥孔铖血蓝蛋白文献资料
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小鼠源性ABIN1蛋白的抗体制备及功能验证
目的 制备小鼠源性A20结合核因子KB活化抑制蛋白1(A20 binding inhibitor of NF-KB activation 1,mABIN1)的多克隆抗体并进行功能验证,利用该抗血清对大鼠脑区ABIN1的分布进行验证.方法 利用mABIN1片段与钥孔铖血蓝蛋白(keyhole limpet hemocyanin,KLH)耦联得到的肽段为免疫原,免疫新西兰大耳白兔3次,共35 d,获得抗血清,分别用ELISA、蛋白免疫(Western)印迹和免疫组织荧光化学法对抗体的特异性进行验证；使用上述验证所得的特异性抗血清,通过Western印迹检测ABIN1在大鼠各脑区的分布；对所得到的特异性抗血清进行纯化.Western印迹证明,纯化后的抗体杂带较纯化前明显降低,但效价也有所下降.结果与结论 成功制备了兔抗小鼠ABIN1抗血清并对抗血清进行纯化,经该抗血清首次验证ABIN1在大鼠嗅球、皮质、海马、纹状体、伏隔核、丘脑、下丘脑、小脑、脑干及脊髓等中枢神经系统不同部位均有广泛分布,为在动物体内进行ABIN1生物学功能研究提供了有利工具.
