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基于毛细管电泳的细胞SELEX方法的初步建立
目的:初步建立一种基于毛细管电泳技术的细胞指数式富集的配基系统进化(SELEX)技术,实现快速、高效和微量筛选.方法:以表达有绿色荧光蛋白的HepG2细胞作为靶细胞,FITC标记的DNA文库作为初始文库,采用带有激光诱导荧光检测器的毛细管电泳(CE)进行检测分离,收集制备次级文库.同时采用常规方法进行了一轮细胞筛选,以进行比较.结果及结论:流式分析结果显示与常规方法相比,引入毛细管电泳分离技术后经过一轮筛选,特异配基即获得了较好的富集.这表明基于毛细管电泳的细胞SELEX方法获得了初步建立,为实现肿瘤细胞的快速微量筛选奠定了基础.
关键词: 指数式富集的配基系统进化 寡核苷酸配基 电泳 毛细管 肿瘤细胞 -
寡核苷酸配基在临床诊断和疾病治疗中的应用
利用指数级富集的配基进化(SELEX)技术筛选得到的寡核苷酸配基与靶分子的结合具有亲和力高、特异性强的特点,在临床诊断和疾病治疗中具有一定的优势,有可能发展成为一类新型药物和诊断试剂.本文从配基的筛选和改造,配基作为蛋白功能阻断剂、靶向剂和体外诊断试剂的应用和配基在应用中可能存在的问题等几个方面,对用SELEX技术筛选的寡核苷酸配基在临床诊断和疾病治疗中的应用进行综述.
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配体指数级系统进化技术及其在实验诊断中的应用
SELEX技术是一种新的组合化学技术,利用该技术从随机寡核苷酸文库中筛选出与靶分子结合的寡核苷酸配基,具有极高的亲和力和特异性,在临床诊断中比蛋白类抗体有更明显的优越性,显示出广阔的应用前景。