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突变型碱性磷酸酶文献资料
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单链抗体-碱性磷酸酶检测系统的建立
目的:建立简便快速的单链抗体检测方法.方法:用PCR法和DNA重组技术构建了突变型碱性磷酸酶基因和单链抗体-突变型碱性磷酸酶融合基因;利用IPTG诱导融合基因的表达,并用pNPP底物液检测碱性磷酸酶的活性,用ELISA法检测和比较了不同单链抗体的相对活性.结果:实现重组突变型碱性磷酸酶基因在大肠杆菌中的功能性表达,且活性较重组野生型碱性磷酸酶活性高30倍左右.重组单链抗体-突变型碱性磷酸酶融合基因在大肠杆菌中获得功能性表达,周质中表达产物具有双功能,并成功地利用该系统分析了不同单链抗体的相对活性.结论:该单链抗体-碱性磷酸酶检测系统能够方便地应用于单链抗体的活性分析.
