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9225 bp文献资料
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电离辐射诱导的两种新线粒体DNA缺失的分析鉴定
目的 筛选电离辐射诱导的线粒体DNA(mtDNA)缺失类型,并进行鉴定.方法 用10 Gy 60Co γ射线照射正常人淋巴细胞细胞系,用2对引物的长PCR扩增照射前后样品的mtDNA基因组.发现可能缺失片段后用限制条件的普通PCR进行确认,并对PCR产物进行纯化、克隆、测序和核酸同源性(BLAST)分析.结果 照射前的淋巴细胞系mtDNA样品只扩增出预期全长片段,照射后每对引物还扩增出可能为缺失造成的短片段;进一步限制条件的普通PCR证实了mtDNA缺失的存在.PCR产物经纯化、克隆后测序进行BLAST分析表明两种mtDNA缺失分别为7455 bp(重链nt475～7929)、9225 bp(重链nt7714～369)的mtDNA缺失,均发生在8 bp正向重复序列之间.进一步的生物信息学检索得出两种mtDNA缺失为新发现的mtDNA缺失类型.结论 电离辐射诱导出人淋巴细胞mtDNA 7455 bp和9225 bp缺失.
