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HPLC-在线固相萃取小柱法测定参附注射液中酯型生物碱的含量
目的 HPLC-在线固相萃取小柱法测定参附注射液中酯型生物碱的含量.方法 采用戴安UltiMateTM 3000-DGLC双梯度液相色谱,在线固相萃取小柱Ionpac NGI(4 mm ×35 mm),Acclaim 120 C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,注射液先经在线固相萃取小柱净化样品并富集生物碱后,再进入C18柱分离,1次进样完成6种生物碱的含量测定,样品进样量可达到1 ~2.5 ml,适合于样品的微量分析.结果 6种生物碱的线性范围分别为苯甲酰新乌头原碱212~4240 ng(r=0.9999)、苯甲酰乌头原碱184 ~3680 ng(r=0.9996)、苯甲酰次乌头原碱168 ~3360 ng(r =0.9997)、新乌头碱164~3280 ng(r =0.9999)、次乌头碱216 ~4320 ng(r=0.9998)、乌头碱232 ~4640 ng(r=0.9998).6种酯型生物碱的平均回收率为95.8% ~ 103.2%,RSD均小于4.3%.精密度、重复性、稳定性、回收率均符合要求.结论 此方法准确、可靠,可用于参附注射液中酯型生物碱的含量测定.