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野牛金荞麦文献资料
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野生金荞麦高黄酮含量愈伤组织中一个类异黄酮还原酶(IRL)基因的克隆与分析
木脂素是重要的植物防御物质之一,具有优良的生物学活性.为研究传统抗肿瘤良药野生金荞麦的药用次生代谢,用RACE与文库结合的方法,从野生金荞麦高黄酮含量愈伤系cDNA文库中快速克隆了一个类异黄酮还原酶(isoflavone reductase-like,IRL)基因FcIRL的全长eDNA(accession no.EUII6032).FcIRL cDNA全长1 217 bp,含有1个942 bp的开放阅读框(open reading frame,ORF),编码313个氨基酸,其5'LJTR区含有2个终止子TAG,3'UTR区含有推测的加尾信号ATAAA和polyA尾,对应基因组序列不含内含子.FcIRL蛋白N端含有1个N-乙酰化作用位点(Ml-K5)和1个保守的NADPH结合位点(G10-G-T-G13-Y-I-G16),具有1个保守的NmrA结构域(V6-N244)和多个重要的磷酸化位点,以及1个保守的N-糖基化作用位点(N214).序列同源性比较、系统发生分析以及蛋白质高级结构预测分析均表明,FclRL属丁松脂醇-落叶松脂醇还原酶(pinoresinol-lariciresinol reductase,PLR)类,推测具有PLR的生物活性,是8-8'连接木脂素(8-8'-linked lignans)合成途径中的关键酶,催化松脂醇和落叶松脂醇,还原生成开环异落叶松脂(secoisolariciresinol),参与金荞麦药用次生代谢与植物的防御.
