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基于液滴微流控芯片技术的抗白念珠菌药物筛选研究
本文发展了一种用于筛选抗白念珠菌药物的液滴微流控芯片技术,自行制备了液滴生成芯片,利用阿尔玛蓝在活细胞存在下能显示荧光信号的特性,将其作为指示剂和药物、白念珠菌一起包裹在液滴中,能快速检测候选化合物的抗真菌活性.以4种抗真菌药物两性霉素B、卡泊芬净、5-氟胞嘧啶、特比萘芬和新药艾迪康唑为研究对象,分别进行抗白念珠菌活性分析,并与常规的96孔板法进行比较.结果表明,液滴芯片方法孵育2h即可实现抗真菌药物活性的快速分析,所测得的小抑菌浓度值与96孔板法的一致率为100％,而且试剂消耗非常少.本文建立的液滴微流控芯片法简便快速,适用于大量抗真菌药物的快速筛选.
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微孔板阿尔玛蓝显色法检测速生长分枝杆菌药物敏感性
目的 建立微孔板阿尔玛蓝显色法检测速分枝杆菌药物敏感性的方法,评价其临床检测效能.方法 用GenoType Mycobacterium CM分枝杆菌菌种鉴定系统和测序法筛选20株龟分枝杆菌临床株、16株脓肿分枝杆菌临床株作为实验株,阿尔玛显色法检测龟、脓肿分枝杆菌对阿米卡星、头孢西丁、环丙沙星、克拉霉素、多西环素、亚胺培南、利奈唑胺、磺胺甲恶唑和妥布霉素9种抗生素的低抑菌浓度,以微量肉汤稀释法为标准评价符合率和MIC结果解释的一致率.结果 微孔板阿尔玛蓝显色法检测9种抗生素的MIC值分布与微量肉汤稀释法MIC值符合率分别为100％(阿米卡星、环丙沙星、利奈唑胺)、97.2％(头孢西丁、克拉霉素、多西环素、妥布霉素)、94.4％(亚胺培南)和88.9％(磺胺甲恶唑)(±11og2范围内)；MIC结果解释一致率头孢西丁和利奈唑胺为94.4％,妥布霉素和磺胺甲恶唑为97.2％,其余5种药物药敏结果解释均完全一致.结论 微孔板阿尔玛蓝显色法是一种简便、易于判读、准确的MIC测定方法,可用于速生长分枝杆菌临床分离株的快速药敏测试.
