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MDR1 siRNA文献资料
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GGI/MDR1 siRNA逆转A549/DDP细胞多药耐药的研究
通过RNA干扰(RNAi)技术靶向耐药性人肺腺癌细胞内的MDR1基因实现多药耐药性的逆转作用.构建聚乙二醇-聚谷氨酸-聚乙烯亚胺(PEG-b-PLG-g-PEIs,GGI)阳离子聚合物载体,通过1H NMR表征确认结构,动态光散射法测定GGI/siRNA的粒径及电位,并以A549敏感株和A549/DDP耐药株细胞系为模型,采用MTT法考察GGI的细胞毒性,以流式细胞术评价新型聚合物载体GGI递送siRNA的效率和强度,RT-PCR法考察GGI转染A549和A549/DDP (cisplatin)后MDR1 mRNA水平的表达;Western blot法测定A549/DDP细胞中P-gp的表达.同时,以MTT法和Annexin V-FITC/PI双染法考察siRNA干扰后抗肿瘤药物对药物敏感性的变化.结果显示,GGI/siRNA复合物粒径为150～200 nm,电位稳定在16～28 mV.GGI细胞毒性远低于PEI25K,且具有更高运载siRNA至细胞内的效率,并能极大降低A549/DDP细胞内MDR1 mRNA和P-gp的表达,能更大程度地增强耐药细胞株对顺铂的敏感性,说明GGI有望在基因传递系统中成为一种新型的聚合物载体并广泛应用.
关键词： 基因传递系统 RNA干扰 多药耐药性 MDR1 siRNA A549/DDP细胞
