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Ⅱ型核糖体失活蛋白文献资料
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猪苓Ⅱ型核糖体失活蛋白A链基因的克隆以及原核表达
采用RT-PCR技术从中国野生猪苓菌核(Polyporus umbellatus)中克隆得到一个Ⅱ型核糖体失活蛋白(type Ⅱ ribosome inactivating protein,RIP)A链基因,该基因cDNA包含的完整开放阅读框为873 bp,编码的氨基酸为290个,分子质量为32.33 kDa,理论等电点为5.58.氨基酸序列分析表明,该基因编码的蛋白具有RICIN 超家族蛋白的保守结构域.氨基酸序列多重比对及系统发育树结果显示,猪苓RIP与硬柄小皮伞(Marasmius oreades)亲缘关系近.实时荧光定量PCR分析表明,这个基因在不同的菌核部位都有表达,且在蜜环菌侵染的菌核部位表达显著上调,提示该基因可能参与了猪苓响应生物胁迫过程.此外,利用基因重组技术构建pET15b-PuRIP原核表达载体,获得了高质量的His-PuRIP融合蛋白,为多克隆抗体的制备提供材料基础,为研究基因功能奠定基础.
