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日本蟾蜍TAGLN2 cDNA的克隆与生物信息学分析
为研究蟾蜍皮肤中多肽类有效成分,通过菌落PCR (polymerase chain reaction)对日本蟾蜍(Bufojaponicus formosus)皮肤cDNA质粒文库进行筛选,对测序结果进行分析及同源性比较,获得转胶蛋白-2(transgelin-2,TAGLN2)的5'端缺失的部分cDNA序列(GenBank登录号为JX197456),长为997bp,包括348 bp的开放阅读框(open reading frame,ORF)、5’端31 bp及3’端618bp的非翻译区(untranslated region,UTR),编码由115个氨基酸残基组成的蛋白质.推导的氨基酸序列含有一个调宁蛋白同源性结构域(calponin homology,CH)、两个可形成二硫键的半胱氨酸残基、3个α螺旋区域和5个潜在的磷酸化位点.氨基酸序列同源性分析显示,本文获得的日本蟾蜍N-端截短型TAGLN2与热带爪蟾(Xenopus (Silurana) tropicalis)和非洲爪蟾(Xenopus laevis)相对应部分的同源性分别为90%和89%,与其他7种动物的同源性介于71%~85%之间.