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荧光共振能量转移效应文献资料
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基于FRET效应对纳米递药系统胞内释药检测方法的建立
目的:以2种荧光标记物之间的荧光共振能量转移效应(FRET)为基础,建立一种纳米递药系统细胞内释药的测定方法,并对该方法进行实验验证.方法:以香豆素-6(Cou-6)为荧光探针标记的药物模型,采用二硫键还原法以罗丹明B异硫氰酸酯(RBITC)标记的白蛋白制备载Cou-6的白蛋白纳米粒.根据FRET效应建立纳米粒释药的荧光检测方法,分别采用该法和超滤离心法对载药纳米粒在缓冲液中的释药行为进行测定,通过比较2种方法的检测结果对FRET法进行验证,并且以FRET法对载Cou-6的白蛋白纳米粒在MCF-7细胞内的Cou-6释放进行考察.结果:载Cou-6的白蛋白纳米粒具有显著的FRET效应,药载比为0.000 5时,FRET指数为0.33.缓冲液中的释药结果显示FRET法与超滤离心法的测定结果无显著差异.MCF-7细胞中的Cou-6释放实验表明Cou-6在12h可持续从递药系统中释放,释药半衰期为27.3 h.结论:本文建立的FRET法,可实现对该递药系统胞内释药的定量测定.
关键词: 纳米递药系统 胞内释药 荧光共振能量转移效应