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重组溶葡球菌酶的体外抗菌活性研究
目的:评价重组溶葡球菌酶对545株临床分离葡萄球菌的体外抗菌活性.方法:采用平皿二倍稀释法,测定重组溶葡球菌酶对545株葡萄球菌的低抑菌浓度(MIC);采用试管二倍稀释法和平皿计数法测定此酶对45株葡萄球菌的低杀菌浓度(MBC);采用不同浓度重组溶葡球菌酶不同时间的杀菌结果绘制杀菌曲线,检测其对4株受试葡萄球菌的动态杀菌趋势;此外,测定不同培养条件对MIC的影响.结果:此酶对257株金葡球菌具有较强的体外抗菌活性,对288株凝固酶阴性葡萄球菌的抗菌活性相对较弱;结合MBC和杀菌曲线结果,可以判断此酶对敏感菌为快速杀菌作用,并呈浓度依赖性;pH,细菌接种量及高浓度血清蛋白对MIC有一定影响,受试浓度的二价金属离子对MIC影响不明显.结论:重组溶葡球菌酶主要对金葡菌体现强大的抗菌活性,对耐甲氧西林金葡菌(MRSA)和甲氧西林敏感金葡菌(MSSA)的抗菌作用没有明显差别,有进一步研究的价值.
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重组溶葡球菌酶治疗小型猪皮肤烫伤MRSA感染
目的:评价重组溶葡球菌酶对实验性皮肤烫伤耐甲氧西林金葡菌(MRSA)感染的抗感染作用.方法:用中国实验用小型猪建立局部皮肤烫伤后MRSA感染模型,不同处理组创面治疗3 d或7 d后,进行痂下组织活菌计数及组织病理学观察,评价药物抗菌疗效.结果:重组溶葡球菌酶对烫伤皮肤的感染细菌有较好的清除作用,治疗后d 4和d 8高浓度(1 000 U·mL-1)组创面活菌计数[(5.94±0.61)和(4.03±0.75)lg CFU·g-1组织]均明显低于空白对照组[(7.48±0.33)和(6.32±0.60)lg CFU·g-1组织]和阳性药SD-Ag组创面[(7.44±0.19)和(5.29±0.40)lg CFU·g-1组织],P＜0.05或P＜0.01;治疗后d 8,中浓度(330 U·mL-1)组创面活细菌计数[(5.10±0.29)lg CFU·g-1组织]明显低于空白对照组创面[(6.32±0.60)lg CFU·g-1组织],P＜0.05.组织病理学观察也反映了重组溶葡球菌酶的良好疗效.结论:重组溶葡球菌酶对MRSA引起的实验性皮肤烫伤感染有良好的抗感染作用.
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HPLC法测定重组溶葡球菌酶及相关物质的研究
目的 用HPLC法测定重组溶葡球菌酶及其相关物质,进行相关验证和研究.方法 高压液相色谱法,色谱柱为SOURCETM 5RPC ST 4.6/150,流动相系为水-乙腈缓冲液,检测波长为280 nm,重复进样6次,验证方法的重复性;分析重组溶葡球菌酶及其相关物质,验证方法的分离度;不同浓度样品进样,确定该方法的线性范围.结果 重复进样变异系数<5%,重组溶葡球菌酶和其主要杂质的分离度R>1.5,重组溶菌酶在250～5 000 U/ml范围内呈良好的直线关系.结论 该方法重复性好,专属性强,准确性高,可以很好的满足溶葡球菌酶原料药HPLC的纯度检测.
