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真核细胞翻译启动因子5A(eIF5A)文献资料
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pcDNA3.1/eIF5A真核表达载体的构建及其在真核细胞CCRF-CEM中的表达
目的:摸索真核细胞翻译启动因子5A(eIF5A)编码基因的合成、pcDNA3.1/eIF5A真核表达载体的构建及其在真核细胞CCRF-CEM中的表达.方法:用PCR合成eIF5A基因,将基因分别接在克隆载体pMD 18-T的EcoR V多克隆位点上和真核表达载体pcDNA3.1的Hind Ⅲ和EcoR Ⅰ的多克隆位点之间,构建eIF5A基因的克隆载体和真核表达载体,分别在大肠杆菌E.coli DH5α中转化并提取质粒,将真核表达载体pcDNA3.1/eIF5A的质粒提取后,用脂质体包合并转染真核细胞CCRF-CEM,用流式细胞仪对eIF5A的表达水平进行检测.结果:eIF5A在CCRF-CEM细胞中的表达水平为107.03,eIF5A在转染细胞CCRF-CEM/trans中的表达水平为114.27,表达升高.结论:本实验构建了pcDNA3.1/eIF5A真核表达载体,发现其在CCRF-CEM细胞中高表达.本实验结果将有助于探讨肿瘤治疗过程中的新靶标.
