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增溶剂对九类人癌细胞的影响作用
目的 抗肿瘤药物筛选常用各种增溶剂或者溶剂混合物增溶难溶化合物.本实验系统考察了各类常见助溶剂对9类人癌细胞生长的影响,为溶解低水溶性抗肿瘤化合物选取适当溶媒提供参考.方法 采用磺酰罗丹明B法,研究聚乙二醇400(PEG400)、聚山梨酯类(聚山梨酯20、聚山梨酯80)、乙醇、丙三醇、聚氧乙烯环氧蓖麻油(Cremophor EL)、二甲基亚砜及前六种溶剂与二甲基亚砜不同配比的共19种溶剂组合对生长相对较快的A549(人肺癌细胞株)、HCT116(人肠癌细胞株)、786-0(人肾癌细胞株)、OVCAR-3(人卵巢癌细胞株)、K562(人白血病细胞株)、SF295(CNS)、DU-145(人前列腺癌细胞株)、MCF7(人乳腺癌细胞株)及UACC-257(人黑色素瘤细胞株)等9种人癌细胞生长的影响.结果 细胞生长率＞90％(percentagegrowth)时视为溶剂对细胞生长无明显抑制作用；80％＜细胞生长率＜90％时视为弱抑制作用；细胞生长率＜80％时视为强抑制作用.本实验认为具有弱抑制作用或者无明显抑制作用(细胞生长率＞80％)的溶剂系统可用于筛选.当二甲基亚砜终体积分数小于0.1％时对9种测试细胞均显示弱抑制作用或无明显抑制作用；单独PEG400及乙醇终体积分数为0.25％以及丙三醇终体积分数为0.5％时,对9种测试人癌细胞呈弱抑制作用；PEG400、乙醇及丙三醇与二甲基亚砜比例为1∶1(体积比),在终体积分数为0.25％时对9种人癌细胞呈弱抑制作用；PEG400与二甲基亚砜比例为1∶9(体积比),终体积分数为0.1％、乙醇及丙三醇与二甲基亚砜比例为1∶9(体积比),终体积分数为0.25％时对九种细胞的作用为弱抑制作用；单独聚山梨酯20、聚山梨酯80、Cremophor EL以及三者与二甲基亚砜比例为1∶1(体积比)时,在体积分数0.1％对所有的测试癌细胞均表现出显著的强抑制作用；当比例为1∶9(体积比)时,三者中仅Cremophor EL/二甲基亚砜在终体积分数为0.1％时可选择性用于A549、786-0、OVCAR-3、SF295、DU-145和UACC-257等5种细胞的筛选.结论 利用上述9种人癌细胞筛选抗癌化合物时,乙醇、丙三醇、PEG400及三者与二甲基亚砜不同比例配伍(1∶1及1∶9)时,推荐使用终体积百分比不高于0.5％ (0.25％/0.25％及0.05％/0.45％)；单独二甲基亚砜使用终体积分数低于0.25％为宜；不建议使用或添加聚山梨酯20、聚山梨酯80及Cremo-phor EL等三种溶剂,但必要时可在低比例混合溶剂条件下小心使用Cremophor EL助溶.不同细胞的敏感度不同,人白血病细胞K562对所有溶剂均较敏感,人乳腺癌细胞MCF7尤其对二甲基亚砜敏感,使用时应特别注意.
