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酪氨酸/代谢文献资料
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游离脂肪酸对大鼠骨骼肌细胞胰岛素受体与胰岛素受体底物1的表达和酪氨酸磷酸化的影响
目的:探讨游离脂肪酸是否通过改变胰岛素信号传导蛋白的表达和功能状态影响骨骼肌细胞的葡萄糖代谢.方法:分离培养Wistar大鼠骨骼肌细胞.软脂酸(0.25 mmol*L-1)或油酸(0.125 mmol*L-1)与骨骼肌细胞共同孵育6、12、24 h,提取蛋白后用Western杂交方法检测胰岛素受体和胰岛素受体底物1(IRS-1)的蛋白水平,同时应用免疫沉淀和免疫杂交技术检测胰岛素刺激后胰岛素受体β亚单位和IRS-1的酪氨酸磷酸化程度.结果:(1)软脂酸或油酸作用后骨骼肌细胞的胰岛素受体蛋白质表达量无改变.(2)骨骼肌细胞与软脂酸或油酸共同孵育12和24 h后胰岛素受体β亚单位的酪氨酸磷酸化显著降低.(3)骨骼肌细胞在软脂酸或油酸作用后各个时间点的IRS-1蛋白质量均明显降低.(4)骨骼肌细胞经软脂酸或油酸作用后IRS-1的酪氨酸磷酸化在各个时间点均显著降低.结论:游离脂肪酸可能通过抑制骨骼肌细胞的IRS-1蛋白质表达和胰岛素受体的酪氨酸磷酸化以及IRS-1的酪氨酸磷酸化阻滞胰岛素信号传导,引起骨骼肌胰岛素抵抗.