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  • 利用EBV转化人类外周血B淋巴细胞获得永生化细胞株保存人类全基因组

    人类外周血 B 淋巴细胞可以被 ebv 在适当的体外环境中转化成具有永生化特征的 lcl。保存了各人的完整基因组,且其生化和分子生物学特征不发生变化。环孢霉素 a 法是建立珍贵样本的 lcl 的首选方法。采血12到36小时分离转化 B 淋巴细胞,转化液中添加 cysa、pha,控制转化时细胞数量在10/ml 数量级有助于提高建株率。37℃5%二氧化碳恒温培养,及时添加新鲜的rPMi 1648培养液以及全程无菌操作防止细菌真菌污染至关重要。慢冻迅速升温是冻存、复苏的关键。原代和继代之间 G 条带分析、核型对比、对常见变异位点应用 Pcr 进行质控有助于发现 lcl 的细胞变异。

    关键词: eBV转化 B淋巴细胞 lcl
  • 诱导特异性CTL为基础的EBV相关肿瘤免疫治疗策略

    作者:彭光勇;姚堃

    pstein-Barr病毒(EBV)属于γ-疱疹病毒家族,在人群中感染非常普遍,在体内以潜伏和增殖状态存在.它是传染性单核细胞增多症(IM)的病原,同时也能引起B淋巴细胞增生性疾病.EBV也是重要的肿瘤DNA病毒,目前发现其与非洲儿童Burkitt's淋巴瘤(BL)和鼻咽癌(NPC)、何杰金氏淋巴瘤(HD)、成人T细胞淋巴瘤及各种免疫抑制剂治疗病人和器官移植病人的淋巴细胞增生紊乱引起的淋巴瘤等密切相关.EBV感染在体内能激发强烈的特异性杀伤性T细胞(CTL),其能控制病毒的潜伏、增殖、维持及转化.大量研究表明,EBV相关肿瘤患者体内也存在着一定的EBV特异性CTL前体细胞,用各种方式激发这些前体细胞并扩增回输体内,能达到免疫治疗的目的.本文将以诱导特异性CTL为基础的EBV相关肿瘤免疫治疗的研究进展综述如下.

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