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PTA-1-/-/ApoE-/-双基因敲除小鼠的繁育及基因型鉴定
目的 建立(PTA-1-/-/ApoE-/-)双基因敲除小鼠(double-gene knockout,DKO)模型,探讨该小鼠的繁育及鉴定方法,为进一步利用该小鼠研究相关疾病奠定基础.方法 将引进的PTA-1-/-及ApoE-/-基因敲除小鼠通过杂交和互交的方法进行繁殖,以得到DKO小鼠.结果 经过PCR基因鉴定的方法证实PTA-1-/-/ApoE-/-双基因敲除小鼠繁育成功.结论 正确的饲养繁殖及鉴定方法是获得该DKO纯合子小鼠的有效途径.
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瘦素和载脂蛋白E基因共同缺陷促进糖尿病动脉粥样斑块形成
目的 通过瘦素基因缺陷的肥胖型II型糖尿病小鼠与ApoE基因敲除(ApoE Knockout)的高胆固醇血症合并动脉粥样硬化的小鼠进行杂交,产生混合性高甘油三酯血症和高胆固醇血症并较单纯ApoE基因敲除小鼠具有更明显的血管动脉粥样硬化.方法 采用杂交、回交、互交的方法 进行培育,提取小鼠尾部基因组DNA进行PCR分析和血浆脂质测定,并从大体病理标本上,主动脉纵切面观察比较血管动脉粥样硬化情况.结果 通过上述培育方法 ,成功得到Leptin及ApoE双基因敲除小鼠.成年小鼠表现为极度的混合型高脂血症,其血浆甘油三酯和胆固醇水平是正常小鼠的2.6倍和8.6倍,其主动脉血管粥样硬化斑块较单纯ApoE基因敲除小鼠更为明显.结论 成功培育了Leptin/ApoE双基因敲除的遗传性混合型高甘油三酯、高胆固醇血症小鼠并具有更明显的动脉粥样硬化斑块.
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H2-Eb1+H2-Ab1双基因敲除小鼠的鉴定及繁育
目的 饲养、繁殖和鉴定H2-Eb1+H2-Ab1双基因敲除小鼠,获得双纯合子H2-Eb1-/-+H2-Ab1-/-及双野生型H2-Eb1+/++H2-Ab1+/+小鼠,为深入研究H2-Eb1、H2-Ab1的基因功能奠定基础.方法 基因敲除小鼠经适应性饲养2 w后,分别将雌性杂合子和雄性杂合子小鼠合笼饲养并繁殖,提取鼠尾DNA,利用PCR法鉴定其基因型.生产后代中的野生型和纯合子小鼠用于后续的生物学功能研究,杂合子小鼠用于繁殖及保种.结果 小鼠成功繁殖,其中双纯合子H2-Eb1-/-+H2-Ab1-/-20只(20％),双野生型H2-Eb1+/++H2-Ab1+/+26只(26％),未鉴定出基因型54只(54％).成功获得H2-Eb1+H2-Ab1双基因敲除纯合子小鼠,并建立了饲养、繁殖和鉴定方法.结论 采用雌性和雄性H2-Eb1+H2-Ab1双基因敲除杂合子小鼠交配,不仅可以获H2-Eb1+H2-Ab1双基因敲除纯合子小鼠,而且有利于长期饲养与繁殖.
