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Kiss-1基因在人鼻咽癌细胞株中的表达探讨
目的 检测Kiss-1基因在5种不同转移习性的人鼻咽癌细胞株CNE-1、CNE-2Z、SUNE-1、SUNE-1-5-8F、SUNE-1-6-10B中的蛋白和mRNA水平的表达情况.方法 应用逆转录酶聚合酶链式反应(RT-PCR)和免疫组织化学法在mRNA和蛋白水平检测5种细胞株中Kiss-1基因的表达.结果 5种细胞株中Kiss-1蛋白的表达皆为阳性,在低转移性细胞株SUNE-1-6-10B中Kiss-1基因在蛋白水平的表达显著高于其他具有较高转移习性细胞株中的表达(P＜0.01).5种细胞株中均扩增出Kiss-1 mRNA,在低转移性细胞株SUNE-1-6-10B中Kiss-1基因在mRNA水平的表达显著高于其他具有较高转移习性细胞株中的表达(P＜0.01).结论 Kiss-1基因在低转移性人鼻咽癌细胞株细胞中高表达,而在高转移性人鼻咽癌细胞株细胞中低表达,提示了该基因可能在鼻咽癌肿瘤细胞转移机制中发挥重要的抑制作用.
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济南地区2009-2013年手足口病分子流行病学特征
目的 对2009-2013年山东省济南地区手足口病(HFMD)的病原及流行特征进行分析,了解HFMD的发病特点及流行趋势,为HFMD防控提供科学依据.方法 选取济南地区2009-2013年临床诊断为HFMD的病例为对象,收集各县(市、区)疾病预防控制中心对辖区内发生的HFMD病例的流行病学调查资料,采集患者发病1周内的粪便、咽拭子等标本共计3 792例,采用肠道病毒通用(PE)、肠道病毒71型(EV71)和柯萨奇病毒A组16型(CoxA16)特异性引物通过逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)进行病原学分析;采用SPSS 11.0统计软件对流行病学资料进行统计分析.结果 2009-2013年济南地区3 792例HFMD患者(包括138例重症)标本中,2 843例检测到肠道病毒,阳性率为74.97％;其中1 143例为EV71阳性(40.20％),955例为CoxA16阳性(33.59％),其他肠道病毒(EV)阳性737例(25.92％),EV71和CoxA16混合感染阳性8例(0.28％);138例重症患者的感染病原主要为EV71 (86.36％);HFMD患者主要集中于＜4岁儿童(82.15％),发病高峰集中于4-5月份(31.70％),肠道病毒阳性检出率与性别无关;5年间呈现出EV71和CoxA16交替流行的态势,病原构成比之间差异有统计学意义(x2=116.38,P＜0.05).结论 山东省济南地区2009-2013年HFMD病原以EV71和CoxA16为主,并交替流行;EV71是引起HFMD重症及死亡病例的主要毒株类型.
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联合检测外周血中AFPmRNA和AFP在原发性肝癌诊断中的临床意义
目的 采用巢式RT-PCR法检测外周血中AFPmRNA情况.探讨外周血中AFPmRNA和AFP在原发性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)联合诊断及在高危人群普查中的作用,为HCC诊断及普查提供一种新的敏感、特异、简单快捷的方法.方法 采用巢式RT-PCR法对25例HCC患者,慢性肝炎、急性肝炎、肝硬化、健康人各30例以及肝外恶性肿瘤10例的外周血AFPmRNA情况进行检测.同时检测各组相应的AFP浓度和HCC患者血清HBsAg表达情况.结果 (1)外周血AFPmRNA检查:25例HCC患者中19例存在AFPmRNA,阳性率为76%,其余各组均未检出AFPmRNA,特异性100%;(2)血清AFP水平检测:25例HCC患者中有16例存在AFP阳性,阳性率64%,其余各组有5例检出AFP阳性.(3)HCC血清HBsAg检测:HBsAg阳性的16例HCC患者中15例检出AFPmRNA,而9例HBsAg阴性的HCC患者中仅4例检测出AFPmRNA.HBsAg与外周血中AFPmRNA阳性检出率有相关性.结论 外周血AFPmR-NA联合血清AFP检测,可以有效提高HCC诊断,为联合检测诊断HCC提供了有效的途径;可以用于HCC高危人群的普查及筛选.
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银屑病患者皮损组织中分泌型磷脂酶 A2-ⅡA 表达的研究
目的：试图从分泌型磷脂酶 A2-IIA（sPLA2-IIA）角度研究其表达与银屑病皮损的关系。方法依据 PASI 评分将寻常性银屑病皮损患者30例分为三组，轻度组11例，中度组10例，重度组9例。非银屑病对照组患者28例。免疫组织化学法检测银屑病患者皮损组织切片和对照组 sPLA2-IIA 表达情况，观察银屑病患者 sPLA2-IIA 表达阳性率与 PASI评分关系。结果银屑病皮损患者 sPLA2-IIA 表达阳性率＋～分别为40％，20％和40％。对照组 sPLA2-IIA 仅表达阳性率（＋）为8％，两组比较差异有统计学意义（χ2＝61.47，P ＜0.01）。重度组 sPLA2-IIA 表达（）阳性率为88.89％，中度组 sPLA2-IIA 表达（）阳性率为40％，轻度组 sPLA2-IIA 表达（）阳性率为0，三组差异有统计学意义（χ2＝16.3，P＜0.01）。sPLA2-IIA 表达与 PASI 评分呈显著的正相关（rs ＝0.95，P ＜0.01）。结论sPLA2-IIA 的高表达与银屑病皮损的发生有关，提示 sPLA2-IIA 可能是银屑病分子诊断和靶向治疗的靶点。
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RT-PCR检测乳腺癌患者外周血表皮生长因子受体和细胞角质蛋白-19mRNA的表达
目的探讨逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法检测乳腺癌患者外周血表皮生长因子受体(EGFR)mRNA作为乳腺癌循环肿瘤细胞标志的可能性及意义.方法以转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法,分别对40例乳腺癌患者和30例健康人静脉血进行EGFRmRNA检测,同时与目前研究较多的循环上皮细胞标志:细胞角质蛋白CK-19的mRNA做比较.结果在30例健康人外周静脉血中没有发现EGFRmRNA的表达(0%),但有8例CK-19阳性(26.7%).而40例乳腺癌患者检测出13例EGFR mRNA阳性(32.5%),与正常人相比P＜0.01,两组间存在显著性差异;CK-19的mRNA阳性例数为14(35.0%),与正常人相比P＞0.05,两组间无统计学差异.通过免疫组化检测到25例(62.5%)的肿瘤组织中EGFR阳性,所有外周血中EGFR mRNA阳性的病例,相应的原发肿瘤病灶中EGFR蛋白均为阳性,组织中EGFR蛋白高表达的患者外周血EGFR mRNA检出率也高(P＜0.01).26例初治患者中5例EGFR mRNA阳性(19.2%),14例复治患者中8例EGFR mRNA阳性(57.1%),两组相比P＜0.05,存在显著性差异.6例曾使用过紫杉醇类药物挽救化疗的转移性患者中1例EGFR mRNA阳性(16.7%),8例未使用过紫杉醇类药物挽救化疗的转移性患者中7例EGFR mRNA阳性(87.5%),两组相比P＜0.05,存在显著性差异.结论 CK-19的mRNA作为乳腺癌循环肿瘤细胞的标志无诊断意义,但EGFR mRNA有望作为检测乳腺癌循环肿瘤细胞的有效标志.RT-PCR检测乳腺癌患者外周血EGFR mRNA有助于判断预后.紫杉醇类药物有助于降低乳腺癌复发转移的风险.
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2008-2010年哈尔滨市889例手足口病患者EV71病毒感染情况分析
目的 了解2008-2010年哈尔滨市辖区医院收治的889例手足口病患者EV71病毒感染情况.方法 采用两个样本率比较的假设检验,对889例手足口病患者咽拭子、粪便、肛拭子等标本RT-PCR或Real-time PCR EV71核酸鉴定结果,按不同性别、不同居住地、不同年龄和不同发病时间分类进行比较,分析2008-2010年手足口病患者EV71感染情况.结果 3年合计,男性患者EV71阳性检出率高于女性(35.82％ vs 28.32％),农村患者阳性检出率高(37.60％),城市(27.42％)与乡镇(27.36％)则相近；2～岁患者阳性检出率(37.56％)高,其次为1～岁(34.98％)、3～岁(32.77％)和4～岁患者(32.69％),0～岁(29.63％)和5～岁(20.88％)相对较低；7月阳性检出率(38.11％)高,其次为6月(35.48％)、5月(34.07％).3年实验室监测确证EV71感染率分别为31.40％、25.00％和41.24％,3年间患者样本阳性检出率差异与分类情况有关.结论 2008-2010年哈尔滨市辖区医院收治的手足口病患者EV71阳性检出率按不同性别、不同居住地、不同年龄组、不同发病时间分析,其差异与分类情况有关,手足口病患者EV71病毒检出率以农村1～4岁男性儿童高,每年检出高峰时间不同.
