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CNN3文献资料
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靶向调控大鼠海马 CNN3基因表达载体的构建及鉴定
目的：建立可调控大鼠局部脑区CNN3基因表达的技术，为进一步研究CNN3基因参与脑内病理生理过程奠定基础。方法设计并合成针对CNN3基因的全长编码序列cDNA和3条shRNA干扰靶点序列，利用基因工程技术构建CNN3-OE和3个CNN3-shRNA慢病毒载体，在立体定位仪引导下注入大鼠海马，采用蛋白免疫印迹技术筛选CNN3基因的佳沉默序列，并找出重组表达和沉默慢病毒载体调控海马CNN3基因的变化规律。结果 CNN3-OE和3个CNN3-shRNA慢病毒干扰载体均构建成功，转染后8周内对海马CNN3基因水平均有一定调控作用，其中CNN3-shRNA2载体组在转染后的8周内海马CNN3基因编码蛋白calponin-3水平均显著性下调，高抑制率为73.26％；CNN3-OE慢病毒载体组中海马calponin-3蛋白水平具有统计学意义的升高仅在转染后第14天，上调率为93.88％。结论通过定位注射CNN3-OE和CNN3-shRNA慢病毒载体可在体调控局部脑区CNN3基因表达，为后续的机制研究和开拓疾病防治新途径奠定基础。
