您当前的位置：
首页 > 文献资料
所属专业：
抗IgY文献资料
-
兔抗麻雀IgY酶标抗体的制备
目的 制备辣根过氧化物酶(HRP)标记的兔抗麻雀IgY抗体,为禽类血清学检测体系的建立提供技术储备.方法 硫酸铵盐析法粗提麻雀血清IgY,进一步在SDS-PAGE上分离后,切下带有目的 条带的凝胶作为免疫原,免疫实验兔制备抗血清,Protein-A柱亲和纯化兔抗IgY血清IgG,,使用改良过碘酸钠法制备酶结合物.ELISA检测酶标抗体的工作浓度,western blotting检测酶标抗体的特异性.结果 ·硫酸铵盐析法粗提IgY,可去除部分杂蛋白,SDS-PAGE上分离后切下带有目的 条带的凝胶,可以得到足够纯度的抗原,将带有IgY的凝胶作为抗原免疫后获得的抗血清经Protein-A纯化后,二抗在SDS-PAGE上鉴定,纯度达到99%以上.改良的过碘酸钠法标记获得的抗体浓度为1.008 mg/mL, ELISA检测酶标抗体效价为1:1000.Western blotting鉴定抗体具有特异性.结论 获得了优质可靠的兔抗麻雀IgY酶标抗体.
