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腺病毒介导siCD44实验性治疗人CNE-2L2鼻咽癌
目的 探讨用siCD44治疗实体瘤的可能性.方法 以高表达CD44的人鼻咽癌细胞CNE-2L2为研究对象,用软琼脂集落形成实验和细胞接种裸鼠后成瘤性生长及肿瘤肺转移检测细胞恶性生物学行为.构建Ad5-siCD44,用293细胞包装产生病毒.接种CNE-2L2细胞于裸鼠皮下,待肿瘤长到50～100 mm3大小,瘤体内注射Ad5-siCD44,以注射PBS或Ad5-egfp为对照,2周后比较肿瘤的大小和重量.结果 CD44表达抑制致细胞的恶性生物学行为明显受抑.瘤体内注射PBS、Ad5-egfp和Ad5-siCD44 2周后,肿瘤的平均体积分别为(3.139±0.850)、(3.612±0.888)和(1.512±0.742)cm3,实验组与对照组相比差异有显著性(P＜0.05).3组的平均瘤重分别为(2.28±0.73)、(1.83±0.26)和(1.20±0.64)g,实验组与对照组相比差异有显著性(P＜0.05).结论 瘤体内注射Ad5-siCD44对CD44高表达的鼻咽癌细胞CNE-2L2所生成的肿瘤有一定治疗作用.
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BCSC-1基因异位表达抑制鼻咽癌细胞的恶性生物学行为
目的 研究BCSC-1基因异位表达对人鼻咽癌细胞CNE-2L2恶性生物学行为的影响.方法 RT-PCR扩增BCSC-1 cDNA,分别构建原核重组表达载体pMAL-c2X-BCSC-1和真核重组表达载体pcDNA4/myc-His A-BCSC-1.在原核细胞表达BCSC-1蛋白.用BCSC-1蛋白免疫新西兰白兔,制备BCSC-1抗血清.采用实时定量RT-PCR与用BCSC-1抗血清免疫荧光染色确认野生型CNE-2L2细胞的BCSC-1基因低表达.藉脂质体把pcDNA4/myc-His A-BCSC-1转染入野生型CNE-2L2细胞.Western blot检测BCSC-1基因在野生型CNE-2L2细胞异位表达.用体外培养中的生长曲线和集落生成检测细胞生长.接种细胞于裸鼠,定时测量肿瘤大小.小鼠肺做连续组织切片,观察肿瘤的肺转移.结果 制备了BCSC-1抗血清.明确BCSC-1基因在野生型CNE-2L2细胞的表达极低.制备了BCSC-1基因异位表达的CNE-2L2细胞.与对照细胞(野生型CNE-2L2细胞和转染pcDNA4/myc-His A的CNE-2L2细胞)相比,BCSC-1基因异位表达的CNE-2L2细胞在培养中的生长、集落生成、细胞的成瘤性生长和所长肿瘤的肺转移均明显抑制.结论 BCSC-1基因异位表达对CNE-2L2细胞的恶性生物学行为有明显抑制作用.
