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  • 人B淋巴细胞活化相关新基因的克隆

    作者:芦兴武;殷际义;崔莲仙

    分离新的与B细胞活化相关基因。方法采用差异显示反转录PCR(DDRT-PCR)技术对人扁桃体活化和静止B细胞mRNA的差异表达进行分析,差异显示的片段经过Northern杂交验证后,作为探针进行人活化B细胞cDNA文库的筛选。结果差异显示分析共获得明显的差异表达的标签序列(expresed sequence tag,EST)62条,其中主要在静止B细胞表达的有32条,在活化B细胞表达的有30条。经Northern杂交验证,共获得阳性的片段25条。以在活化B细胞中高表达的EST30为探针,经3轮筛选人活化B细胞文库后获得1个新的全长为2 048 bp的cDNA克隆。该克隆含有1个630bp的开放读码框。其推断的氨基酸序列N端与酵母的动力蛋白KAR3部分同源。结论克隆了1条可能与B细胞活化相关的新基因。

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