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多重连接依赖的探针扩增技术检测中国人遗传性非息肉病性结直肠癌错配修复基因大片段缺失
目的 了解中国人遗传性非息肉病性结直肠癌(HNPCC)家系hMSH2和hMLH1基因大片段缺失特点.方法 采用多重连接依赖的探针扩增(MLPA)技术和GeneMapper分析技术检测17个HNPCC家系先证者hMSH2和hMLH1基因种系大片段缺失.结果 在3个家系中分别发现hMSH2基因第8外显子、1～6外显子和1～7外显子3种大片段缺失类型,未发现hMLH1基因大片段缺失.大片段缺失占hMSH2和hMLH1基因总种系病理性突变的19%.结论 中国人HNPCC错配修复(MMR)基因大片段缺失发生率较高,hMSH2基因缺失可能更为常见.在分子遗传学检测中有必要开展MMR基因大片段缺失的检测.
关键词： 遗传性非息肉病性结直肠癌 大片段缺失 多重连接依赖的探针扩增 -
多重连接依赖的探针扩增方法对原发性智力低下患儿进行亚端粒重排分析
目的 了解原发性智力低下伴单发或多发畸形患儿中染色体亚端粒重排的发生率,寻找智力低下的致病原因.方法 180例符合本组入选标准的原发性智力低下患儿,抽取外周血,乙二胺四乙酸钠(EDTA)抗凝.提取基因组DNA并进行纯化.用多重连接依赖的探针扩增(MLPA)方法的试剂盒P036B/C和P070进行检测,对使用2个试剂盒均存在相同异常的样本,再选用针对异常区域特异性的试剂盒P096、P064和P023鉴定或判断发生异常片段的大小.MLPA主要实验步骤包括:DNA变性、分子杂交、连接反应和特异PCR扩增,扩增的PCR产物用ABI 3100测序仪进行基因型分析,终所得数据用GeneMarker软件进行分析.结果 在180例原发性智力低下患儿中发现13例存在染色体亚端粒重排(7%):其中12例为致病性,均为新生突变;1例2号染色体长臂末端缺失(2qdel)来源于表型正常的父亲.结论 亚端粒重排是原发性智力低下伴单发或多发畸形的致病原因.
关键词： 智力 染色体 端粒 多重连接依赖的探针扩增 -
自然流产绒毛染色体非整倍体探讨
目的:探讨自然流产绒毛染色体中非整倍体对流产的影响.方法:对100例自然流产绒毛用常规染色体核型分析联合多重连接依赖的探针扩增(multiplex ligation-dependent probe amplification,MLPA)分析.结果:核型分析成功84例,异常核型48例,其中非整倍体34例；16例无核型的绒毛用MLPA分析,异常8例,非整倍体4例；非整倍体占异常核型的67.9％.结论:染色体发生非整倍体突变是胚胎早期自然流产的重要原因;常规染色体核型分析还是诊断非整倍体的主要方法,应用MLPA方法能对染色体核型分析失败和核型正常的标本作进一步检测.
关键词： 自然流产 绒毛 非整倍体 多重连接依赖的探针扩增 -
多重连接依赖的探针扩增检测Rett综合征患儿大片段缺失
目的:筛查Rett综合征(Rett syndrome,RTT)患儿甲基化CpG结合蛋白2(methyl-CpG-binding protein2,MECP2)基基因大片段缺失及重复.方法:采用多重连接依赖的探针扩增(multiplexligation-dependentprobeamplification,MLPA)方法对88例确诊RTT(PCR及测序未见MECP2突变)患儿进行此基因突变分析.结果:MECP2大片段缺失的突变筛出率为11％,除外1例非典型RTT,其余均为典型RTT,且9例涉及第3和/或第4外显子.结论:MLPA作为MECP2筛查的重要补充,典型及非典型患儿都应进行.
关键词： 多重连接依赖的探针扩增 Rett综合征
