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实时荧光定量聚合酶链反应技术在人乳头状瘤病毒检测中的应用研究
目的:评价实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)技术在女性生殖道人乳头状瘤病毒(HPV)检测中的临床效用.方法:2005年6月~2006年2月在中日友好医院妇产科行宫颈癌筛查女性4689例中抽取600例,按组织病理结果分为炎症组,宫颈上皮内瘤变(CIN)Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组,宫颈癌组和湿疣组.用FQ-PCR法进行宫颈细胞8种HPV基因型分型及定量检测,并同时用杂交捕获二代(HC-Ⅱ)行13种高危型HPV检测,比较两种不同方法各组检测结果的一致性;根据FQ-PCR所得HPV-DNA拷贝数分析病毒载量与宫颈病变关系.结果:FQ-PCR和HC-Ⅱ两种方法检测高危型HPV的一致性较好,总符合率86.67%,宫颈癌组符合率100%,总Kappa指数(KI)0.722,炎症组0.650,宫颈上皮内瘤变(CIN)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组KI分别为0.514、0.583、0.697,湿疣组0.659.宫颈癌的病毒载量明显高于宫颈癌前病变和宫颈炎(P<0.05).不同级别宫颈病变的病毒载量与官颈炎存在显著性差异(P<0.01),宫颈高度病变组(≥CINⅡ)的病毒载量显著高于宫颈低度病变组(CINⅠ)(P<0.01),但宫颈高度病变组(CINⅡ与CINⅢ)之间无统计学差异(P>0.05).结论:实时荧光定量PCR技术与HC-Ⅱ法检测结果一致性较好,在分型的同时亦可进行病毒量的定量检测,是检测宫颈HPV感染的有效手段.HPV-DNA病毒载量随宫颈病变的级别的增高而增加.