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碱性成纤维细胞生长因子对紫外线诱导豚鼠巩膜细胞凋亡的影响及其与凋亡抑制基因bcl-2的相关性研究
目的 探讨碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)对紫外线(uhraviolet,UVA)诱导的巩膜细胞凋亡的影响及其对凋亡抑制的发生机制.方法 用组织块培养法培养豚鼠后极部巩膜细胞.利用紫外线诱导细胞凋亡模型,将培养的巩膜细胞分为对照组(无UVA光照)、单纯UVA组(仅暴露于UAA照射),并于UVA照射前加不同剂量的bFGF( UVA+ 10 μg/L bFGF组,UVA+20 μg/L bFGF组,UVA+40 μg/L bFGF组).以流式细胞仪检测细胞凋亡,以RT-PCR法和Western-blot技术测定B细胞淋巴瘤-白血病-2基因(B-cell lymphoma/leukemia 2,bcl-2)的表达.结果 组织培养后1~2周开始有细胞长出,3~4周融合,免疫荧光鉴定细胞为巩膜成纤维细胞.流式细胞仪检测显示,bFGF能够抑制UVA诱导的巩膜细胞凋亡,对巩膜细胞有保护作用,且bFGF浓度高于20 μg/L时抑制作用更加显著;RT-PCR法、Western-blot检测显示,UVA能够引起凋亡抑制基因bcl-2表达下调,但bFGF能够抑制UVA的下调作用,且随着bFGF浓度的升高其抑制效果逐渐增强,巩膜细胞bcl-2基因的表达也逐渐增加.结论 外源性bFGF能够通过上调凋亡抑制基因bcl-2的表达而抑制巩膜细胞的凋亡.
关键词: 巩膜成纤维细胞 bFGF B细胞淋巴瘤-白血病-2基因 凋亡