首页 > 文献资料
-
透射电子显微镜超薄切片机的原理及常见故障维修
超薄切片机是透射电子显微镜样品制作专用必备精密仪器,其机构看似简单,但对机械加工精度高、金属材料选择十分苛刻.尽管国内有些厂家试图仿造该仪器,至今鲜有成熟产品出现.
-
AODO细胞浸渍-扫描电镜样品的制备
传统方法显示心肌间质中胶原纤维的形态,多依赖于组织学的切片和光学显微镜的观察,很难展示其立体的构筑形式和细微的结构特征.如何制作用于扫描电镜观察的胶原样品,在国内尚未见有报道.我们经过反复的实验,摸索出AODO细胞浸渍(四氧化锇细胞浸渍)-扫描电镜样品的制备方法,使此问题得以解决.材料和方法:①升主动脉插管,生理盐水冲洗;②0 .5%戊二醛+0.5%多聚甲醛灌注固定;③取左心室壁,修块至3×3×5mm;④入 1%锇酸后固定;⑤于0.1%锇酸20℃中浸渍3~5天;⑥经50%二甲基亚砜包埋; ⑦液氮中冷冻断裂;⑧1%锇酸和单宁酸导电染色;⑨真空干燥、喷镀,电镜观察.结果: 扫描电镜下,可观察到位于心肌细胞和毛细血管之间的各种粗细不等的胶原纤维,可观察到胶原纤维编织成的各种网状和框架式的结构,以及它们的立体构筑形式.意义:利用此方法制备的样品,不仅可在扫描电镜下甚为清晰地、立体地显示胶原纤维的形态和结构,亦可同时显示心肌细胞、毛细血管和胶原纤维间的形态和位置关系.我们认为它是使用电镜技术研究细胞间质各结构的理想方法.心得和体会:①为保证样品制作的质量,固定样品时,样品体积不可过大,固定时间不可过长,否则细胞表面和胶原的结构不易显露;②0.1%锇酸的浸渍是样品制备是否成功的关键一步,其温度须控制在20℃左右,温度过低,细微结构显示不清;温度过高,样品极易破碎.