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  • 连接介导PCR分析线粒体DNA的氧化损伤频率及损伤热点

    作者:刘力;庄志雄;陈雯;杨杏芬;凌文华;魏青;邓丽霞

    目的 论证线粒体DNA(mitochondrial,mtDNA)"常见缺失"与DNA氧化损伤的关系. 方法 采用连接介导PCR(ligation mediated PCR,LMPCR),在大鼠肝细胞株(BRL-3A)暴露于50 mmol/L 过氧化氢(H2O2)形成氧化损伤后,分析该缺失的断裂区段(8071~8190,约120 bp)内,各核苷酸氧化损伤的频率及热点. 结果 在8071~8190区段,存在8181G、8182G两个明显的氧化损伤热点,8108C及8096~8101(6 bp)的损伤亦明显;而"常见缺失"的断裂位点(8118T)并未被明显氧化损伤.其中,8181G/8182G位于一个DNA重复结构内,8096~8101(6 bp)则位于一个DNA回文结构内. 结论 线粒体DNA"常见缺失"的断裂位点不一定是氧化损伤的热点,但在断裂区段内存在2个氧化损伤热点.

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