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镍冶炼烟尘染毒致NIH/3T3细胞线粒体损伤及L-抗坏血酸的干预作用
目的 研究镍冶炼烟尘对小鼠胚胎成纤维细胞(NIH/3T3)线粒体损伤的影响及L-抗坏血酸的保护作用.方法 将NIH/3T3细胞分为染毒组和L-抗坏血酸干预组.染毒组加入镍冶炼烟尘配制浓度分别为0.00、25.00、50.00、100.00 μg/ml的混悬液,干预组在染毒前额外加入L抗坏血酸(100 mmol/L).利用MTT法检测细胞生长抑制率,钙黄绿素-AM荧光探针检测细胞线粒体膜通道孔(MPTP)变化,JC-1荧光染色观察并检测细胞线粒体膜电位(MMP)变化,比色法定量检测细胞线粒体呼吸链复合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ活性变化.结果 随着染毒浓度升高,染毒组和干预组细胞生长抑制率均明显增加.在25.00、50.00、100.00 μg/ml浓度时干预组抑制率均低于染毒组,差异有统计学意义(P＜0.05).在50.00、100.00μg/ml浓度时,染毒组MPTP荧光强度为564.940±14.015、436.613±31.275;干预组MPTP荧光强度为611.203±20.053、498.840±21.308,干预组的荧光强度均高于染毒组,差异有统计学意义(P＜0.05);荧光显微镜下干预组绿色荧光强度低于染毒组,干预组红色荧光强度高于染毒组.在25.00、50.00、100.00 μg/ml浓度时,染毒组MMP绿色与红色荧光比值分别为16.579±0.220、14.453±0.280、11.133±1.007;干预组MMP绿色与红色荧光比值分别为18.697±0.163、16.260±0.520、13.703±0.715,干预组绿色与红色荧光比值均高于染毒组,差异有统计学意义(P＜0.05).在25.00、50.00、100.00 μg/ml浓度时,干预组的复合物Ⅰ、Ⅳ活性均高于染毒组,在100 μ#ml浓度时,复合物Ⅱ染毒组活性为0.754±0.013,干预组活性为0.827±0.032,干预组的复合物Ⅱ活性高于染毒组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 随着镍冶炼烟尘浓度升高,NIH/3T3细胞线粒体损伤程度上升,L-抗坏血酸对镍冶炼烟尘致细胞线粒体损伤有一定保护作用.
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镍冶炼烟尘对NIH/3T3细胞吞噬活性的影响
目的 研究镍冶炼烟尘对NIH/3T3细胞的毒性.方法 以我国某镍冶炼厂的镍冶炼炉前沉降尘和镍精矿车间沉降尘为受试物,观察NIH/3T3细胞对其的吞噬活性,并用噻唑蓝(MTT)比色的方法检测细胞活性.结果 两受试物均可被NIH/3T3细胞吞噬,在200 μg/ml时的吞噬率分别为100.0%、83.0%;100 μg/ml时的吞噬率为77.0%、58.8%;50 μg/ml时的吞噬率为59.8%、30.5%,差异均有统计学意义(P<0.05);且随作用时间增长,细胞生长受到抑制程度也随之增加.接触24 h,两受试物细胞半数抑制浓度分别为19.86、30.15 μg/ml.结论 两受试物均可诱导NIH/3T3细胞吞噬活性,可以降低细胞的成活率,为镍冶炼烟尘的致癌危险性以及镍冶炼工肺癌病因学研究提供新的实验依据.
