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紫杉醇完全抗原的合成鉴定及免疫原性分析
目的 制备红豆杉属植物中抗癌成分紫杉醇(paclitaxel,TAX)的人工抗原及抗血清,为获取分泌抗紫杉醇抗体的单克隆细胞系及分离单链抗体基因、进而以之提高植物中紫杉醇的量,及建立快速检测TAX的酶联免疫吸附测定(ELISA)法提供技术基础.方法 将7-木糖基紫杉醇(7-xylotaxol,7-xyl-TAX)经NalO4氧化打开糖环,与载体蛋白牛血清白蛋白(BSA)反应偶联,制得半抗原-载体蛋白复合物后,用基质辅助激光解吸飞行时间质谱测定其中结合的半抗原数目;以此抗原免疫BALB/c小鼠,制备抗血清.并通过ELISA法检测其抗体效价和特异性.结果 合成的人工抗原TAX-BSA中TAX与BSA的结合比约为4~5:1;免疫小鼠到特异针对TAX的抗血清,TAX抗体的效价为1:3 200.结论 成功地合成了TAX的人工抗原,且该抗原有较好的免疫原性.
关键词: 紫杉醇 半抗原-载体蛋白复合物 免疫原性 摹质辅助激光解吸飞行时间质谱 -
石杉碱甲人工抗原的合成、鉴定及免疫原性分析
目的 制备乙酰胆碱脂酶抑制活性成分石杉碱甲(huperzine A,HupA)的人工抗原及抗血清.方法 将HupA与戊二醛、载体蛋白牛血清白蛋白(BSA)反应偶联,制得半抗原-载体蛋白复合物后,用基质辅助激光解吸飞行时间质谱测定其中结合的半抗原数目;以此抗原免疫BALB/c小鼠,制备抗血清,并通过ELISA法检测其抗体效价和特异性.结果 合成的人工抗原HupA-GA-BSA中HupA与BSA的结合比约为8:1;免疫小鼠得到特异针对HupA的抗血清,HupA抗体的效价为1:62 500.结论 成功地合成了HupA的人工抗原,且该抗原有较好的免疫原性.
关键词: 石杉碱甲 半抗原-载体蛋白复合物 免疫原性 酶联免疫吸附测定