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细胞壁缺陷对伤寒沙门菌苹果酸脱氢酶活性影响的实验观察
目的了解细胞壁缺陷对伤寒沙门菌苹果酸脱氢酶(MDH)活性的影响.方法采用分光光度法检测伤寒沙门菌及其细胞壁缺陷突变株的苹果酸脱氢酶(MDH)的活性.结果伤寒沙门菌具有明显的MDH活性,其反应A值于20分钟时达高峰;细胞壁缺陷株的MDH活性明显降低,其反应A值于60分钟时达到高峰,且峰值小于细菌型所得峰值.结论伤寒沙门菌具有较高的MDH活性,细胞壁缺陷可使其MDH的活性显著降低.
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细粒棘球蚴中国大陆株线粒体苹果酸脱氢酶基因的克隆和序列分析
目的获得细粒棘球蚴线粒体苹果酸脱氢酶(mMDH)基因片段,进行序列分析,为研究包虫病疫苗候选基因奠定基础.方法从包虫病患者体内获取细粒棘球蚴原头蚴提取总RNA,根据国外细粒棘球蚴mMDH(线粒体苹果酸脱氢酶)基因的已知序列设计一对引物,采用RT-PCR技术扩增出细粒棘球蚴中国大陆株mMDH基因,将PCR产物纯化后,亚克隆到pGEM-T载体并构建成基因工程菌株后进行序列测定和分析.结果用RT-PCR成功扩增出细粒棘球蚴中国大陆株mMDH基因,测序表明该基因开放阅读框为1017bp,与已发表基因核苷酸序列相比,同源性为99%,理论蛋白编码的氨基酸序列同源性为99%.结论在国内首次获得细粒棘球蚴线粒体苹果酸脱氢酶(mMDH)基因序列,为进一步构建重组表达基因工程菌株打下良好的基础.