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甲基纤维素半固体培养基文献资料
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重组人心肌肌钙蛋白I单克隆抗体的制备及鉴定
目的 制备重组人心肌肌钙蛋白I(rhcTnI)的单克隆抗体,并对其单克隆抗体的特性进行鉴定.方法 利用纯化后的rhcTnI作为免疫原,常规免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与同系骨髓瘤细胞Sp2/0进行常规融合,用甲基纤维素半固体培养基法获得单克隆抗体杂交瘤细胞株,利用ELISA、Western blot等方法对单克隆抗体的特性进行鉴定.结果 筛选出3株稳定分泌抗rhcTnI的单克隆抗体杂交瘤细胞株,分别命名为4B3、7D5和3E6.3株单克隆抗体的免疫球蛋白亚类分别为IgG1(4B3、7D5)和IgG2b(3E6).3株单克隆抗体与rhcTnI发生特异性结合,而与大肠杆菌菌体蛋白、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)无特异性交叉反应,3株单克隆抗体的亲和力常数分别为1.76×109Umol、143×109L/mol和1.04×109L/mol.结论 获得了效价高、特异性好的抗rhcTn I的单克隆抗体,为cTnI诊断试剂盒的研制奠定了基础.
关键词： 人心肌肌钙蛋白I单克隆抗体 甲基纤维素半固体培养基
