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成骨细胞特异性因子2及其相关因子在大鼠皮肤创面瘢痕重塑期中的表达变化及意义
目的 观察成骨细胞特异性因子2(PN)、血管生成素-1(Ang-1)、血管内皮生长因子(VEGF)及其受体2(Flk-1)在创面及瘢痕中的表达情况,探究其对创伤愈合和瘢痕形成的意义.方法 雄性SD大鼠82只,按随机数字表法将大鼠按预定处死时间分组,每组8～9只,背中部脊柱旁左右各制备1个皮肤全层(正常皮肤)及皮下浅层组织的创面(2cm×2cm),观察创面瘢痕并测量愈合面积；苏木素-伊红(HE)染色行组织病理学观察,免疫组化法检测4～8周创面瘢痕PN、Ang-1、VEGF、Flk-1的表达；各时间点用蛋白质免疫印迹试验(Western blotting)检测PN、Ang-1、VEGF的表达.以正常皮肤作为对照.结果 HE染色显示,4～8周创面组织已愈合、完成了上皮化.免疫组化结果显示,愈合创面组织中Flk-1表达量与正常皮肤无差异,PN表达量(A值/μm2)仅在伤后5周低于正常皮肤(2.43±0.44比4.24 ± 0.50,P＜0.05),4、5、6、8周Ang-1与VEGF的表达量(A值/μm2)均低于正常皮肤(Ang-1:3.51±0.93、3.10 ±0.57、2.77±0.59、2.77±1.26比4.89±0.48,VEGF:1.76±0.68、1.75±0.49、1.99±0.42、1.94±0.86比4.86±1.63,均P＜0.05)；在创面瘢痕中,PN、Flk-1的阳性信号主要集中于细胞内,Ang-1、VEGF的阳性信号主要存在于细胞外基质.Western blotting结果显示,PN、Ang-1、VEGF表达均在创面10 d时达到高峰,并高于正常皮肤表达量的7.90 ～ 22.56倍(PN:2.45±1.51比0.31±0.19、Ang-1:18.43±15.20比1.53±1.42,VEGF:6.09±4.66比0.27±0.13,P＜0.05或P＜0.01),随后迅速下降.结论 PN、Ang-1、VEGF、Flk-1在大鼠全层皮肤缺损创面愈合过程中存在一过性的表达升高,在创面瘢痕中的表达部位和局部表达量与创伤早期相比有一定区别；它们共同参与了大鼠全层皮肤缺损创面修复的过程,其作用可能在创伤修复过程的增生期,在瘢痕中的低表达可能与大鼠的无瘢痕愈合有关.
关键词： 瘢痕 创伤愈合 成骨细胞特异性因子2 血管生成素-1 血管内皮生长因子
