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伴侣分子肽文献资料
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富伴侣分子肿瘤抗原肽复合物的制备
目的:探索制备高免疫原性的富伴侣分子的肿瘤抗原肽复合物的方法与实验条件.方法:设置35 ℃、37 ℃、39.5 ℃和42 ℃等4种不同温度结合天花粉蛋白处理小鼠结肠癌CT26细胞,制备富伴侣分子肿瘤抗原肽复合物,采用淋巴细胞增殖刺激效应实验测定肿瘤抗原肽复合物的免疫活性.结果:随着温度的升高,诱导伴侣分子合成效应越强,以42 ℃诱导的肿瘤细胞合成伴侣分子效应强烈.结论:42℃时配合天花粉诱导的肿瘤细胞合成伴侣分子效应强烈,可提高肿瘤细胞的免疫原性,可在体外致敏树突状细胞(DC)和制作瘤苗,以期在防治大肠癌和其复发上有较好的应用价值.
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模拟热放疗制备的高效伴侣分子抗原肽的抗癌免疫作用
目的 研究高效伴侣分子-抗原肽肠癌疫苗制备方法并为优化肠癌的热、放疗和免疫治疗提供基础资料.方法 将CT26肿瘤细胞置于含榄香烯的培养基中以不同热应激温度培养,继以高能X射线(200cGy)照射;超声裂解细胞后低温离心;盐析法分离上清蛋白;透析去除低于50kD和高于300kD的分子.凝胶过滤结合SDS-PAGE法收取70、90、110和170kD峰段蛋白并合并.Western blotting法对所获蛋白定性;BCA法测量浓度.检测不同条件制备的伴侣分子肽混合物的细胞增殖指数、NK和CTL细胞活性.结果 成功提取制备了富伴侣分子-抗原肽瘤苗;不同条件制备的瘤苗的T细胞增殖指数、NK和CTL细胞活性均明显提高.结论 凝胶过滤结合SDS-PAGE可以较好提取制备主要伴侣分子肽;热放疗可使伴侣分子肽的细胞表达量增加,从而诱导瘤苗产生更强的抗癌免疫作用.其中42℃热应激序贯照射组的瘤苗抗癌免疫作用强.
