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鱼藤素作用K562细胞Topo Ⅰ表达的探讨
目的:探讨鱼藤素对DNA拓扑异构酶Topo Ⅰ表达的影响,进一步明确鱼藤素抑制肿瘤细胞增殖的作用机制.方法:流式细胞术及RT-PCR法分析鱼藤素作用K562细胞后Topo Ⅰ蛋白及mRNA含量的变化.结果:流式细胞术分析结果发现Topo Ⅰ蛋白的平均荧光强度随着鱼藤素作用浓度的增高而逐渐减少,与空白对照组比较有显著差异(P<0.05);RT-PCR半定量检测结果显示,鱼藤素作用K562细胞引起Topo Ⅰ mRNA含量减少,并与其浓度正相关.结论:鱼藤素可通过抑制肿瘤细胞内Topo Ⅰ而发挥作用.
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榄香烯对人肝癌HepG-2细胞增殖及拓扑异构酶Ⅰ的影响
背景与目的:榄香烯(elemene,ELE)是传统抗肿瘤中药制剂,目前药效机制尚不明确.本研究旨在探讨ELE对人肝癌HepG-2细胞增殖及DNA拓扑异构酶Ⅰ(topoisomerase Ⅰ,TOPO Ⅰ)的影响.方法:采用四甲基偶氯唑蓝还原法(MTT)观察ELE对HepG-2细胞增殖的影响;采用流式细胞术(FCM)检测ELE对HepG-2细胞周期的影响;采用RT-PCR法检测ELE对HepG-2细胞TOPO Ⅰ mRNA表达的影响;采用TOPO Ⅰ介导的负超螺旋PBR322DNA 解旋反应检测ELE对TOPO Ⅰ酶活性的影响;采用负超螺旋PBR322DNA检测ELE对DNA的直接抑制作用.结果:ELE能抑制HepG-2细胞增殖,其抑制效应具有时间和剂量依赖性;阻滞HepG-2细胞于S期,呈剂量依赖性;下调TOPO Ⅰ mRNA表达,呈剂量依赖特性;对TOPO Ⅰ介导的负超螺旋PBR322DNA解旋反应有抑制作用;对负超螺旋PBR322DNA没有直接抑制作用.结论:ELE能够抑制HepG-2细胞增殖;影响TOPO Ⅰ的表达及活性可能是其作用机制之一.
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华蟾素注射液对人肝癌HepG-2细胞DNA拓扑异构酶Ⅰ的影响
背景与目的:华蟾素注射液是传统抗肿瘤中药制剂,目前药效机制尚不明确.本研究旨在探讨华蟾素注射液对DNA拓扑异构酶Ⅰ(topoisomerase Ⅰ,TOPO Ⅰ)的影响.方法:采用噻唑蓝还原法(MTT)观察华蟾素注射液对人肝癌HepG-2细胞增殖的影响;采用流式细胞术(FCM)检测对HepG-2细胞周期的影响;采用RT-PCR法检测对HepG-2细胞TOPO Ⅰ mRNA表达的影响;采用TOPO Ⅰ介导的负超螺旋PBR322 DNA解旋反应检测华蟾素对TOPO Ⅰ酶活性的影响;采用负超螺旋PBR322 DNA检测华蟾素对DNA的直接抑制作用.结果:华蟾素注射液对HepG-2细胞增殖具有抑制作用,其抑制效应具有时间和剂量依赖性;并将HepG-2细胞阻滞于S期;RT-PCR检测表明,华蟾素注射液可下调TOPO Ⅰ mRNA表达,表现浓度依赖效应;对TOPO Ⅰ介导的负超螺旋PBR322 DNA解旋反应有抑制作用:对负超螺旋PBR322 DNA没有直接抑制作用.结论:华蟾素注射液能够抑制HepG-2细胞增殖,影响DNA拓扑异构酶Ⅰ酶的mRNA表达及活性可能为机制之一.
关键词: 华蟾素 Topo Ⅰ 肝癌 HepG-2细胞 pBR322 DNA