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牡荆苷与溶菌酶相互作用的荧光光谱学研究
目的:在模拟人体生理条件下,研究牡荆苷与溶菌酶的相互作用的光谱学特征。方法利用同步荧光光谱法和荧光光谱法研究牡荆苷与溶菌酶的相互作用机制、作用力类型,考察牡荆苷对溶菌酶构象的影响。结果牡荆苷对溶菌酶的荧光猝灭机制为静态猝灭,牡荆苷与溶菌酶的结合常数、结合位点数分别为6.73×105 L/mol、1.12,其作用力以疏水作用为主。同步荧光光谱法测定的结合位点靠近色氨酸,并使色氨酸的疏水性增强。结论牡荆苷与溶菌酶结合并改变溶菌酶的构象,共存金属离子对牡荆苷与溶菌酶的相互作用有一定的影响。
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同步荧光法测定血清过氧化脂质
脂质过氧化损伤在糖尿病、感染性疾病、肿瘤、类风湿性关节炎、动脉粥样硬化等许多疾病的发生与发展中起到了重要作用.丙二醛(MDA)是自由基使脂质发生过氧化作用形成的终产物,通常用MDA来反映体内脂质过氧化状态.MDA测定大多采用TBA比色法,通过MDA与硫代巴比妥酸(TBA)加热形成红色复合物,用比色或荧光法[1]测定MDA含量,由于荧光法特异性、灵敏度较高,因而得到了广泛地应用.然而,从目前通常使用的荧光法的荧光光谱中可以看出,该法受到瑞利散射光干扰严重,为了降低散射光的干扰,提高测定的特异性和准确性,我们将同步荧光光谱扫描技术用于测定MDA,获得满意结果,有效地降低散射光的干扰,提高了测定方法的灵敏度和特异性,现报道如下.
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三价铁对灯盏花素与溶菌酶相互作用的影响
目的:探讨三价铁( Fe3+)在模拟人体正常生理环境下对溶菌酶与灯盏花素相互作用的影响。方法运用同步荧光光谱法观察有无Fe3+参与时灯盏花素与溶菌酶的相互作用。结果有、无Fe3+存在,灯盏花素与溶菌酶均可形成基态复合物从而猝灭溶菌酶的内源性荧光,猝灭原因均为静态猝灭。有、无Fe3+存在,热力学温度为308 K时灯盏花素与溶菌酶的结合常数分别为1.15×106、1.08×106 L/mol,结合位点数分别为0.993、1.19。在Fe3+存在时,灯盏花素与溶菌酶作用力由疏水作用改变为范德华力和氢键,结合位点靠近色氨酸,并使色氨酸的疏水性增强。结论 Fe3+不改变灯盏花素与溶菌酶的猝灭作用机制,但使得两者结合常数、结合位点数和作用力类型发生改变。