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Keap1/Nrf2/HO-1文献资料
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穿心莲内酯对脂多糖诱导RAW264.7细胞炎症反应的抑制作用
目的 探讨穿心莲内酯对脂多糖诱导RAW264.7细胞炎症反应的抑制作用及其作用机制.方法 采用噻唑蓝比色(MTT)法分析穿心莲内酯对RAW264.7细胞活力的影响.通过脂多糖处理RAW264.7细胞24 h建立细胞炎症模型,造模前1 h用穿心莲内酯2.5、5、10、20μmol/L预处理.荧光定量PCR法检测RAW264.7细胞内相关抗氧化应激酶基因和iNOS水平.穿心莲内酯单独处理RAW264.7细胞24 h,Western blotting法检测Keap1/Nrf2/HO-1信号通路相关蛋白和Keap1、Nrf2、HO-1蛋白水平.免疫荧光检测转录因子Nrf2在胞质及核内的分布情况.结果 与对照组比较,穿心莲内酯剂量相关性地抑制RAW264.7细胞活力,差异具有统计学意义(P<0.05、0.01、0.001).穿心莲内酯显著抑制脂多糖诱导RAW264.7细胞的iNOS水平(P<0.001),增加相关抗氧化酶基因HO-1、NQO1 mRNA水平.穿心莲内酯抑制Keap1表达,增加Nrf2和HO-1蛋白水平的表达.结论 穿心莲内酯可抑制脂多糖诱导的炎症反应,其作用机制可能与激活Keap1/Nrf2/HO-1信号通路从而调控抗氧化酶HO-1、NQO1 mRNA表达水平相关.
