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零成本快速构建医院药学信息服务平台
目前,人类社会已进入信息化社会,Internet作为世界上规模大、信息资源丰富的计算机网络,越来越受到人们的关注,特别是它在医学领域的普及和广泛运用,必将推动医学事业的发展.如何充分利用这些日新月异的网络医学资源,促进医学现代化,是本世纪医学领域的热门话题[1].
关键词： 零成本 快速构建 医院药学信息服务平台 医院管理 -
复合型组织工程皮肤的体外快速构建
目的 寻找一种体外快速构建复合型组织工程皮肤的方法,为大面积烧伤、创伤创面的覆盖提供足够的自体皮源.方法 取人的包皮,进行表皮细胞及成纤维细胞的分离鉴定及体外培养扩增,对表皮细胞群行广谱角蛋白抗体-异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)、角蛋白19(cytokeratin19,K19)-FITC免疫荧光染色及K19流式细胞仪鉴定;对成纤维细胞行波形蛋白-FITC免疫荧光鉴定.将表皮细胞接种于异体脱细胞真皮(acellular dermal matrix,ADM)乳头面,于气-液平面培养构建表皮层,实验分两组进行,实验组培养基中添加25 ng/ml角化细胞生长因子(keratinocyte growth factor,KGF),对照组不添加.6 d后,接种成纤维细胞于两组ADM的另一面,继续培养24 h.收集构建的组织工程皮肤,切片行苏木素-伊红染色,观察所构建皮肤的镜下结构,并对比添加KGF对其影响.结果 免疫荧光染色培养扩增的表皮细胞群广谱角蛋白抗体-FITC染色均为阳性、K19-FITC染色部分阳性,流式细胞仪鉴定其中K19阳性表达的细胞接近17%.成纤维细胞体外培养7 d可扩增超过100倍,波形蛋白-FITC免疫荧光染色呈阳性.经过7 d的体外培养构建,可以得到复合型皮肤,经苏木素-伊红染色镜下观察显示,实验组表皮层连续,形成细胞层数2～3层的复层结构,真皮中含有成纤维细胞;对照组表皮层不连续,细胞层数少,两组比较差异有统计学意义(P＜0.01).结论 利用胶原酶结合胰蛋白酶消化法进行种子细胞的分离,应用添加KGF的条件培养基,采用分步接种构建的方法,可在7 d内构建出复合型组织工程皮肤.
