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载脂蛋白C-Ⅲ基因多态性与早发冠心病的关系
目的 探讨载脂蛋白C-Ⅲ(ApoC-Ⅲ)C-482T基因多态性与早发冠心痛的关系.方法 172例男性小于55岁,女性小于65岁,行冠状动脉造影检查的患者,按冠脉造影的结果分为早发冠心病细(病例组)及非早发冠心病组(对照组).用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法(PCR-RFLP)检测所有研究对象ApoC-Ⅲ基因型.结果 病例组与对照组基因型频率比较无显著性差异,χ2=0.394,P=0.821;C、T等位基因频率比较无显著性差异,χ2=0.168,P=0.682.结论 ApoC-ⅢC-482T基因型和等位基因频率分布在早发冠心病组和对照组中无差异,不能认为ApoC-ⅢC-482T是早发冠心病的易感基因.
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载脂蛋白C-Ⅲ基因多态性的研究进展
载脂蛋白C-Ⅲ(APOC-Ⅲ)通过抑制脂蛋白酶而调节体内脂质代谢.APOC-Ⅲ基因的多态性变化会影响APOC-Ⅲ蛋白的表达与功能,引起体内脂质代谢的改变.研究比较深入的APOC-Ⅲ基因多态性位点是位于3端非编码区的3238C＞G(即Sstl多态性),位于启动子区胰岛素反应元件上的-482C ＞T和-455T＞C,它们与代谢综合征(MS)、冠心病(CAD)、非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)密切相关.本综述旨在总结前人的研究成果,为今后的工作发现新思路.
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液相色谱串联质谱法检测血清载脂蛋白C的酶解效率
目的 分析液相色谱串联质谱法(LC-MS/MS)检测载脂蛋白(apo)C-Ⅰ、C-Ⅱ和C-Ⅲ的酶解效率,为其准确定量检测提供依据.方法 对不同apo C含量的混合人血清样品进行变性、还原、烷基化等前处理,经胰蛋白酶酶解,用LC-MS/MS定量检测目标肽段;分析多肽释放图谱和样品间多肽释放的相关性.结果 肽段TP(apo C-Ⅰ)、TY(apo C-Ⅱ)和GW(apo C-Ⅲ)的响应值较高.酶解1 h时,肽段ES和DA即达释放峰值;3 h时,TY释放充分;而TP、GW和EF的释放速率相对较慢,在8 h达高值.TP、TY和GW达峰值后,峰面积随酶解时间延长而逐步下降.apo C-Ⅰ释放出的2条肽段EF和TP在5份样品之间一致,相关系数(r)=0.9939(3 h)和0.9929(20 h);apo C-Ⅱ(ES和TY肽段)和apo C-Ⅲ(DA和GW肽段)的r值介于0.9761～0.9973.结论 apo C-Ⅰ、apo C-Ⅱ和apo C-Ⅲ肽段的酶解效率受肽段自身特性和酶解环境影响,合适地选择代表性肽段和酶解条件将有助于其准确定量检测.
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载脂蛋白C-Ⅲ基因沉默对HepG2细胞脂代谢的影响
目的:研究RNAi技术沉默载脂蛋白C-Ⅲ基因(ApoC3)表达后对HepG2细胞内外脂质含量及其他脂代谢相关基因表达的影响.方法:合成3对针对ApoC3 mRNA不同位点序列的小干扰RNA(siRNA),并分组转染至人肝细胞株HgpG2,实时荧光定量PCR和酶联免疫吸附法检测ApoC3 mRNA及蛋白质的表达水平,筛选出沉默效果佳的一对siRNA.将有效的siRNA转染HepG2细胞,48 h后测定细胞内外脂质含量以及脂代谢相关基因的mRNA表达水平.结果:25 nmol/L siRNA和3μ上l/孔(24孔板)转染试剂的转染效率高.ApoC3-siRNA-3对ApoC3基因的沉默效果好,对mRNA的抑制率为94.6％,上清液中检测不到ApoC-Ⅲ.ApoC3-siRNA-3沉默ApoC3基因后细胞内三酰甘油(TG)和胆固醇含量显著高于对照组,细胞外TG含量显著低于对照组.与对照组比较,ApoC3-siRNA-3沉默组载脂蛋白B100基因mRNA表达水平显著增强,肝脂酶基因mRNA表达水平显著降低.结论:ApoC3基因沉默可显著升高HepG2细胞内TG含量及显著降低细胞外TG含量,其可能机制是通过减少极低密度脂蛋白(VLDL)颗粒的分泌以及增加VLDL残粒的摄取.
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肾母细胞瘤血清非炎症标记物SAA1和载脂蛋白C-Ⅲ的筛选、鉴定及验证
目的 在排除炎症因子或炎性蛋白干扰的情况下,筛选肾母细胞瘤(Wilms tumor,WT)血清特异性标志物,进一步鉴定与验证,提高肾母细胞瘤血清特异性标记物的敏感度与准确度.方法 收集2006年1月至2010年8月郑州大学第一附属医院小儿外科收治儿童的303例血清样本,WT患儿术前血清103例(术前组),WT患儿术后血清97例(术后组),健康儿童体检血清103例(对照组).应用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)在排除机体常见炎症因子干扰的前提下,对术前组、术后组和对照组进行筛选并获得特异性蛋白质标记物,高效液相色谱技术(HPLC)和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术(MALDI-TOF-MS)纯化目标血清蛋白,二维液相色谱-线性离子阱质谱联用系统(2D-LC-LTQ-MS)鉴定目标血清蛋白,并通过蛋白质印渍技术(Western-blot)对于以上筛选及鉴定的特异性或者差异性蛋白质进行验证.结果 发现两个质荷比(m/z)为11526 Da和4756 Da的差异性蛋白质,均在术前组中高表达,余两组低表达,术前组与术后组、术前组与对照组比较差异有统计学意义(P均＜0.05).经鉴定此两种差异性蛋白质为血清淀粉样蛋白A1(serum amyloid A1,SAA1)和载脂蛋白C-Ⅲ.结论 本研究获得特异性更强的肾母细胞瘤非炎症性蛋白质标记物SAA1和载脂蛋白C-Ⅲ,并验证了通过这一实验思路和技术流程来鉴定肿瘤蛋白质标记物的可行性,为鉴定其他肿瘤的具有更高特异性的蛋白质标记物奠定了基础.
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载脂蛋白C-Ⅲ在心血管疾病中的研究进展
血脂异常会导致心血管疾病风险增加,降脂可减少动脉粥样硬化及其并发症的发生发展.他汀类药物能有效降低低密度脂蛋白,然而,许多患者在低密度脂蛋白很低的情况下仍发生心血管事件,载脂蛋白C-Ⅲ有直接导致动脉粥样硬化的作用,促发炎症因子的表达释放,是心血管疾病独立危险因素,因而载脂蛋白C-Ⅲ抑制剂为心血管疾病的治疗提供新的干预方式.
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载脂蛋白C-Ⅲ研究进展
载脂蛋白C-Ⅲ是一种水溶性低分子蛋白质,主要分布于血浆高密度脂蛋白、极低密度脂蛋白和乳糜微粒中.新近研究表明,载脂蛋白C-Ⅲ是脂蛋白代谢的重要调节因子,与高三酰甘油血症和心血管疾病进展相关联.载脂蛋白C-Ⅲ在代谢综合征和动脉粥样硬化中起重要作用,可能是心血管疾病进展的重要预测因子.调节载脂蛋白C-Ⅲ代谢也许是控制代谢综合征患者血脂代谢异常和治疗心血管疾病发病的一重要靶点.
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载脂蛋白C-Ⅲ在溃疡性结肠炎及其他肠病中的表达分析
目的 评估载脂蛋白C-Ⅲ(Apolipoprotein,ApoC-Ⅲ)在溃疡性结肠炎(UC)的诊断及鉴别诊断中的作用.方法 收集病理科2003～2011年存档的肠组织标本,UC组38例,克罗恩病(CD)组29例,肠结核组31例,肠淋巴瘤组32例,感染性肠炎组32例,白塞病组28例,正常体检组10例,采用免疫组化检测结肠黏膜的ApoC-Ⅲ表达情况,并用图像分析技术计数切片的阳性细胞数,取光学显微镜下的平均阳性细胞数作为计数标准.结果 UC患者肠粘膜组织中ApoC-Ⅲ的表达(44.44±10.71)显著高于肠结核组(20.76±4.77)、克罗恩病组(18.80±3.60)、肠淋巴瘤组(18.83±3.79)、白塞病组(19.02±3.04)、感染性肠炎组(20.56±3.35)和正常组(30.17±6.27,均P＜0.05);正常组(30.17±6.27)又高于肠结核组(20.76±4.77)、克罗恩病组(18.80±3.60)、肠淋巴瘤组(18.83±3.79)、白塞病组(19.02±3.04)和感染性肠炎组(20.56±3.35,均P＜0.05);但其它5组之间无差异(P＞0.05).结论 ApoCⅢ在UC患者肠粘膜组织的表达较肠结核组、克罗恩病组、肠淋巴瘤组、白塞病组、感染性肠炎组和正常对照组明显增强,提示ApoC-Ⅲ与UC关系密切,可能与UC的发生发展过程相关,并在UC的诊断和鉴别诊断中起关键作用.
