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软骨/关节文献资料
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兔关节软骨细胞的原代培养和去分化现象
目的:建立兔关节软骨细胞分离、培养的方法,探讨其传代过程中细胞外基质及其形态的变化.方法:采用胰酶和Ⅱ型胶原酶两步消化法结合机械吹打获得分散的单个兔关节软骨细胞,观察单层培养的不同代数兔关节软骨细胞的细胞形态变化;采用免疫细胞化学方法检测不同代数兔关节软骨细胞蛋白多糖和Ⅱ型胶原的表达.结果:兔关节软骨经两步消化后,可获得高纯度的软骨细胞,经免疫组化及甲苯胺蓝染色呈阳性结果,同时观察到兔关节软骨细胞在传代过程中细胞发生了去分化现象.结论:软骨细胞单层培养通过传代可以获得大量的试验细胞,但仅限于使用三代以内的细胞.